文献类型：期刊文献

中文题名：重组人酸性成纤维细胞生长因子的分离纯化

英文题名：Purification of Recombined Human Acidic Fibroblast Growth Factor

作者：刘叶青[1];徐殿胜[1];曹学君[1];桑玉英[1];张秀萍[1]

机构：[1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物工程系,上海200237

年份：2001

卷号：27

期号：4

起止页码：361

中文期刊名：华东理工大学学报（自然科学版）

外文期刊名：Journal of East China University of Science and Technology

收录：CSTPCD;;Scopus;北大核心:【北大核心2000】；CSCD:【CSCD2011_2012】；

语种：中文

中文关键词：人酸性成纤维细胞生长因子;肝素亲和层析;凝胶过滤;分离纯化;多肽类细胞生长因子;细胞分裂

外文关键词：rhaFGF; heparin sepharose affinity chromatography; gel filtration; purification

摘要：采用肝素 - sepharose亲和层析和 Sephadex G- 1 0 0凝胶过滤层析法 ,从含 ha FGF基因重组体的大肠杆菌菌体中分离纯化得到人酸性成纤维细胞生长因子 ( rha FGF)。 SDS- PAGE,IEF电泳检测均为单一谱带 ,HPLC层析显示单一蛋白峰。 SDS- PAGE测定 rha FGF分子质量为 1 6.67ku,IEF测定等电点 p I为 4.8,并用 Edman降解法测定了 N-末端氨基酸序列。Balb/ c3T3细胞培养法测定纯化的 rha FGF生物活性 ED50 为 6μg/ L。
Recombined human acidic fibroblast growth factor (rhaFGF) has been isolated and purified from E.coli containing rhaFGF gene recombined plasmid by using heparinsepharose affinity chromatography and sephadex G 100 gel filtration. It showed high purity monitored by SDS PAGE, IEF and HPLC. The molecular weight of rhaFGF was determined to be roughly 16.67ku by SDS PAGE and the pI was 4.8 by IEF. N terminal amino acid sequence was also detected by Edman degradation. The high bioactivity with ED 50 of 6μg/L suggested that rhaFGF had great stimulation to cell cleavage.