文献类型：期刊文献

中文题名：大肠杆菌guaC基因的克隆及高效表达

英文题名：Cloning and Expression of the Gene Encoding the GMP Reductase of Escherichia coli MC4100

作者：糜蓉娟[1];吴海珍[1];叶江[1];张惠展[1];叶勤[1]

机构：[1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237

年份：2003

卷号：29

期号：3

起止页码：252

中文期刊名：华东理工大学学报（自然科学版）

外文期刊名：Journal of East China University of Science and Technology

收录：CSTPCD;;EI(收录号：2003307568882);Scopus;北大核心:【北大核心2000】；CSCD:【CSCD2011_2012】；

语种：中文

中文关键词：guaC;E.coli;MC4100;鸟苷酸还原酶;基因表达

外文关键词：guaC ; E.coli MC4100; GMP reductase; gene expression

摘要：以 E.coli MC41 0 0染色体 DNA为模板使用 PCR扩增技术克隆了鸟苷酸还原酶基因gua C,该基因全长 1 0 44bp,编码相对分子质量为 3 7ku的蛋白质。将该基因直接克隆于 p ET-1 6b质粒的 T7启动子下游 ,得到质粒 p EXP1。转化 E.coli BL2 1 (DE3 ) ,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导 ,获得了高效的表达。含表达质粒的菌体胞内粗提液经酶活分析表明 ,鸟苷酸还原酶的活性为不含质粒的宿主菌的 80～
The gene encoding GMP reductase was cloned from E. coli MC4100 by polymerase chain reaction (PCR). This gene comprises 1 044 bp, and it encodes a polypeptide of M r 37 437. The gene was inserted into the downstream of the T7 promoter of plasmid pET 16b and recombinant pEXP1 was obtained, which was then transformed into E. coli BL21(DE3). There was overexpression under the induction by IPTG. Enzyme assay showed that the activity of GMP reductase increased by 80~85 fold in the recombination strain.