文献类型：期刊文献

中文题名：酶法合成5-杂氮-2’-脱氧胞苷

英文题名：Enzymatic Synthesis of 5-Aza-2'-Deoxycytidine

作者：王丽慧[1];丁庆豹[1];欧伶[1];许彦梅[2];张春燕[2];王玥[2]

机构：[1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237;[2]上海璞诚生物科技有限公司,上海200235

年份：2011

卷号：37

期号：3

起止页码：325

中文期刊名：华东理工大学学报（自然科学版）

外文期刊名：Journal of East China University of Science and Technology

收录：CSTPCD;;Scopus;北大核心:【北大核心2008】；CSCD:【CSCD2011_2012】；

基金：上海市宝山区2010年度"产学研"项目

语种：中文

中文关键词：N-脱氧核糖转移酶II;5-杂氮-2’-脱氧胞苷;合成

外文关键词：N-deoxyribosyltransferase-II; 5-aza-2＇-CdR; synthesis

摘要：将瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)中的N-脱氧核糖转移酶II的基因(ntd)克隆到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建原核表达系统,成功地得到一株大量表达N-脱氧核糖转移酶II的菌株PND。以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂,该重组菌可大量表达N-脱氧核糖转移酶II。在此酶作用下,以5-杂氮胞嘧啶和脱氧胸苷为底物,生成胸腺嘧啶和目标产物5-杂氮-2’-脱氧胞苷。最佳反应条件为:底物浓度均为2 mmol/L,20 mmol/LTris-HCl缓冲液(pH为7.1),200μL酶,最终反应体积2 mL,55℃反应2 h,转化率可达61%。
The enzyme（N-deoxyribosyltransferase-II） gene（ntd） in Lactobacillus helveticus was cloned into E.coli BL21（DE3）to recombine a prokaryotic expression bacteria PND.The bacteria PND expressed large amounts of N-deoxyribosyltransfer ase-II with IPTG as an inducement.The 5-aza-2＇-deoxycytidine and thymine were synthesied at the substrate of 5-azacytosine and deoxythymidine by the enzyme of N-deoxyribosyltrans-ferase-Ⅱ.The optimum condition was 2 mmol/L of subtrates,20 mmol/L of Tris-HCl（pH 7.1）,200 μL of enzyme,2 mL of reaction volume,and 2 h of reaction time at 55 ℃.Conversion of substrate reached 61% at the optimum condition.