文献类型：期刊文献

中文题名：枯草芽孢杆菌ATCC21216腺苷磷酸化酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

英文题名：Cloning and Expression of Bacillus subtilis ATCC21216 Adenosine Phosphorylase Gene in Escherichia coli

作者：全敏[1];高淑红[1];陈长华[1]

机构：[1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237

年份：2007

卷号：33

期号：1

起止页码：33

中文期刊名：华东理工大学学报（自然科学版）

外文期刊名：Journal of East China University of Science and Technology

收录：CSTPCD;;EI(收录号：20071510544958);Scopus;北大核心:【北大核心2004】；CSCD:【CSCD2011_2012】；

语种：中文

中文关键词：腺苷磷酸化酶;deoD基因克隆;蛋白表达;大肠杆菌

外文关键词：adenosine phosphorylase; deoD; gene cloning; protein expression; E. coli

摘要：聚合酶链式反应(PCR)扩增枯草芽孢杆菌ATCC21216(His-)编码腺苷磷酸化酶的基因deoD(0.7 kb),测序表明与枯草芽孢杆菌168的deoD同源性为98.7%。将此基因插入质粒pET28a(+)(5.3 kb)中,重组质粒pETdeoD在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了表达,表达量占总蛋白的27%。以HPLC方法测定腺苷磷酸化酶的比酶活为每毫克蛋白0.151 U。
The gene deoD（0. 7 kb） of B. subtilis ATCC21216 encoding an adenosine phosphorylase was amplified by polymerase chain reaction（PCR）. Results of sequencing showed 98. 7 % similarity to the same gene of B. subtilis 168. Based on DNA recombinant techniques, the gene deoD was cloned into plasmid pET28a（＋）（5.3 kb） to generate highly effective E. coli BL21（DE3） strain producing adenosine phosphorylase. Expression of the recombinant protein was 27% of the total protein. Specific activity of the enzyme in crude extract determined by high performance liquid chromatography was 0. 151 U/mg protein.