文献类型：专利

中文题名：单细胞DNA损伤的快速检测方法及试剂盒

作者：张阳[1];李萌[1];陶黎明[1];徐文平[1];项光刚[1];朱莲花[1];李瑞瑞[1];王卫国[1];

机构：[1]华东理工大学;

专利类型：发明公开

申请号：CN202110645348.6

申请日：20210610

申请人地址：200237 上海市徐汇区梅陇路130号

公开日：20210917

代理人：李鸿儒

代理机构：31203 上海顺华专利代理有限责任公司

语种：中文

中文关键词：载玻片; 电泳; 盖玻片; 铺胶; 低熔点琼脂糖凝胶; 玻璃棒; 二甲基亚砜; 琼脂糖凝胶; 细胞裂解液; 快速检测; 去离子水; 完全溶解; 细胞悬液; 吹打; 第一层; 混合液; 清洗擦; 曲拉通; 试剂盒; 水平铺; 涂布棒; 染色; 乙醇; 称量; 滴加; 定容; 后移; 混匀; 烤干; 裂解; 凝胶; 烧杯; 备用; 配制; 并用; 分析

摘要：本发明公开了一种单细胞DNA损伤的快速检测方法及试剂盒，包括A、铺胶，电泳载玻片在75％乙醇中清洗擦干后铺第一层胶，铺胶前将载玻片在火焰上烤一遍，在受炙面一端滴加普通琼脂糖凝胶0.1～0.3mL，用涂布棒水平铺拉凝胶到另一端，然后烤干，备用；而后铺第二层胶：取30～50μL细胞悬液与150～250μL 1％低熔点琼脂糖凝胶吹打混匀，再取混合液滴在铺有底胶载玻片的一侧，用盖玻片从有胶的一侧缓缓放下，而后移去盖玻片；B、裂解、解旋，细胞裂解液的配制方法如下：称量Tris0.12～0.15g、NaOH 0.8～1.0g、NaCl 14.5～15.0g、Na₂EDTA 3.72～4.0g置于烧杯中，加入80mL去离子水并用玻璃棒搅拌均匀使其完全溶解，调pH至10后定容至100ml，存放于4℃条件待用，用前加入曲拉通100和二甲基亚砜，终浓度均为1％；C、电泳、染色及分析。