文献类型：专利

中文题名：一种用于在里氏木霉细胞内表达外源蛋白的表达设备及其基因工程菌

作者：魏东芝[1];王玮[1];吕丹丹[1];

机构：[1]华东理工大学;

专利类型：发明专利

申请号：CN201110177811.5

申请日：20110628

申请人地址：200237 上海市徐汇区梅陇路130号

公开日：20130313

代理人：薛琦;钟华

代理机构：31002 上海智信专利代理有限公司

语种：中文

中文关键词：里氏木霉;外源蛋白;外源基因;基因工程菌;高效分泌表达;终止;胞外蛋白质;根瘤农杆菌;编码序列;二元载体;分离纯化;分泌表达;固体培养;培养条件;深层发酵;真菌毒素;转录;启动子;信号肽;真菌;抗生素;克隆;细胞;基因;转化

摘要：本发明公开了一种用于在里氏木霉(Trichoderma reesei)细胞内表达外源蛋白的表达设备及其基因工程菌。该表达设备从5’至3’依次包括以下元件：(1)控制外源基因在里氏木霉中转录的启动子；(2)控制外源蛋白在里氏木霉中分泌表达的信号肽的编码序列；(3)多克隆位点；(4)控制外源基因在里氏木霉中终止转录的终止子。将外源基因插入上述表达设备中，经T-DNA二元载体转化根瘤农杆菌，和里氏木霉接合，所得里氏木霉基因工程菌可高效分泌表达来源于动物、植物和真菌等的异源基因，从中获得外源蛋白的大量生产。该里氏木霉培养条件粗放，适合固体培养和液体深层发酵，在产酶条件下不会产生真菌毒素和抗生素，产生的胞外蛋白质易于分离纯化，成本低廉。