文献类型：学位论文

中文题名：肿瘤多药耐药性的逆转及其以P-GP核苷酸结合域为作用靶点的研究

作者：钱峰[1];

机构：[1]华东理工大学;

导师：杨胜利;华东理工大学|魏东芝;华东理工大学

授予学位：博士

语种：中文

中文关键词：逆转剂;P-糖蛋白;分子模建;肿瘤药耐药性;化疗药物

摘要：本文研究了肿瘤多药耐药性的逆转及其逆转机制。并通过克隆表达、分子模建等手段对MDR靶蛋白P-糖蛋白(P-GLYCOPROTEIN，P-GP)的核苷酸结合域(NUCLEOTIDEBINDINGDOMAIN，NBD)进行了相关的研究。 　　利用荧光酶标仪定量测定MDR细胞中DOX的含量，DMC可明显增加DOX在高表达P-GP的MDR细胞中的积累。5、10、20μMDMC作用KB-A1细胞4小时，DOX积累量分别达到对照组的1.4、1.8、3.1倍。但对于低表达P-GP的敏感细胞KB-3-1则没有这样的效果，说明DMC能抑制P-GP转运功能，促进化疗药物在细胞内的积累。通过RT-PCR方法发现DMC剂量依赖性的抑制MDR1基因的转录，20μMDMC处理KB-AL细胞使MDR1基因的转录水平降到对照组的52％。用WESTERNBLOT方法分析了DMC对核转录因子NF-κB核转位的作用，表明DMC可抑制NF-κB的活化，阻止其进入细胞核，进而抑制MDR1基因的转录，发挥其逆转作用。 　　研究表明P-GP是肿瘤多药耐药性逆转的重要靶标。本文克隆表达了P-GP的核苷酸结合域NBD2，建立了比色法测定其ATPASE酶活的方法。