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生物反应器及其研究技术进展被引量:16收藏 分享
作者:王永红 夏建业 唐寅 杭海峰 易小萍 潘江 许建和 张嗣良
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《生物加工过程》  2013
关键词:生物反应器  计算流体力学  微型生物反应器  动物细胞反应器  酶反应器  
摘要:阐述了生物反应器设计、放大的新理念及关键技术发展,并在此基础上综述了应用于生物技术产品生产的生物反应器的主要发展趋势,包括以代谢流分析为核心的生物反应器系统、基于计算流体力学模拟技术的传统发酵罐改良、微型生物反应器、动物...
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适于重组CHO细胞培养的无血清培养基的制备被引量:8收藏 分享
作者:张大鹤 易小萍 张元兴 孙祥明
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《中国生物制品学杂志》  2011
关键词:CHO细胞  培养基,无血清  
摘要:目的制备适于重组CHO细胞培养的无血清培养基(Serum-free medium,SFM)。方法在本室制备的无血清、低蛋白培养基SFMC的基础上,开发支持重组CHO-K1细胞生长的无动物源、无蛋白培养基(Protein-...
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MDCK细胞微载体悬浮培养放大工艺研究被引量:8收藏 分享
作者:龚迪 易小萍 张元兴
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《中国生物工程杂志》  2012
关键词:MDCK细胞  微载体  低血清培养基  消化放大  
摘要:MDCK细胞对各种流感病毒具有高度敏感性,广泛应用于流感病毒的分离和疫苗制备。通过探索培养基中促进细胞贴壁的关键组分,并筛选水解物,开发了适合MDCK细胞生长的低血清培养基。发现钙、镁离子是细胞贴壁不可缺少的物质,麦麸水...
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PK-15细胞微载体悬浮培养生产猪细小病毒的工艺研究被引量:7收藏 分享
作者:李智力 易小萍 储炬 庄英萍 张嗣良
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《中国生物工程杂志》  2015
关键词:PK-15细胞  PPV病毒  微载体  反应器  
摘要:通过对猪细小病毒接毒时间TOI、MOI和收毒时间进行优化,开发了一种基于PK-15细胞静置培养的猪细小病毒生产工艺,最大病毒滴度达到107.5TCID50/ml。通过进一步优化接毒时间,成功建立了基于PK-15细胞反应器...
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重组CHO-GS细胞降低氨毒副作用的代谢研究被引量:5收藏 分享
作者:张芳 易小萍 孙祥明 张元兴
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《生物工程学报》  2006
关键词:重组CHO细胞  谷氨酰胺合成酶  无血清培养  代谢  氨  
摘要:在重组CHOGS细胞无血清批培养过程中,由于GS系统的引入,使氨对细胞的毒副作用显著降低,从而引起细胞生长和代谢途径发生变化。当起始氨浓度为1.42mmolL时,细胞最高密度可达到15.6×105cellsmL,随着氨浓...
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瞬时基因表达可溶性的VEGFR2:I-IV被引量:5收藏 分享
作者:李军 易小萍 张元兴 孙祥明
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《生物工程学报》  2008
关键词:VEGFR2  瞬时基因表达  HEK293  PEI  
摘要:通过RT-PCR的方法从三个月的流产绒毛组织中克隆目的基因VEGFR2(Vascular endothelial growth factor receptor 2,血管内皮细胞生长因子受体2)胞外I-IV区,连接到真核表...
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温度对重组BHK细胞生长、代谢和vWF蛋白表达的影响被引量:4收藏 分享
作者:易小萍 孙祥明 张元兴
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2007
关键词:重组BHK细胞  细胞培养  温度  细胞周期  细胞凋亡  vWF  
摘要:通过重组幼仓鼠肾细胞(BHK细胞)在不同温度下的批培养和脉冲培养,研究了温度对重组BHK细胞生长、代谢以及血管性血友病因子(vWF)蛋白表达的影响。相对于37℃,升高和降低温度的培养都降低了细胞的生长速率和密度,降温的作...
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表达乙型肝炎表面抗原的重组CHO细胞无血清培养基的优化及生物反应器培养被引量:4收藏 分享
作者:滕小锘 易小萍 孙祥明 张元兴
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《中国生物制品学杂志》  2010
关键词:CHO细胞  肝炎表面抗原,乙型  培养基,无血清  生物反应器  
摘要:目的优化表达乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的重组CHO细胞的无血清培养基,并进行生物反应器高密度培养。方法通过对现有重组CHO细胞无血清培养基SFMB的氨基酸、蛋白类激素、蛋白水解物等的优化,建立针对表达HBsAg的重组...
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稳定表达重组长效促红细胞生成素的CHO-K1细胞株的筛选被引量:4收藏 分享
作者:吴建勇 易小萍 张元兴 孙祥明
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《中国生物制品学杂志》  2011
关键词:促红细胞生成素  密码子  CHO细胞  
摘要:目的将密码子优化的一系列长效促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)基因定点整合至CHO-K1细胞株中,获得高效稳定表达的细胞株。方法对EPO基因定点突变得到Darbepoetin-1序列(专利公开序列)及...
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重组HSV-Ⅱ病毒疫苗的微载体悬浮培养生产工艺研究被引量:3收藏 分享
作者:林美玲 唐寅 张明 易小萍 黄明志
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《中国生物工程杂志》  2014
关键词:Vero细胞  生物反应器  球转球转移放大  重组HSV-Ⅱ  
摘要:经过重组减毒的Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒(rHSV-Ⅱ)在体外具有良好的溶瘤效果,并对小鼠体内B16R黑色素瘤内注射具有较高的疗效。重组HSV-Ⅱ病毒作为高效的新型溶瘤病毒疫苗有望用于肿瘤的临床治疗。Vero细胞是广泛应用于病...
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乳酸脱氢酶基因调控对HEK-293细胞代谢和腺病毒生产的影响被引量:1收藏 分享
作者:缪俊青 易小萍 李祥超 庄英萍
机构:华东理工大学生物工程学院生物反应器国家重点实验室
来源:《生物工程学报》  2023
关键词:乳酸脱氢酶  人胚胎肾细胞(HEK-293)  物质代谢  能量代谢  腺病毒  
摘要:减少乳酸积累一直是哺乳动物细胞生物技术产业的一个目标。体外培养动物细胞时,乳酸积累主要是2种代谢途径作用的综合结果:一方面,葡萄糖在乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)的作用下生成乳酸...
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促红细胞生成素糖基化的等电聚焦电泳分析被引量:1收藏 分享
作者:潘婷琪 易小萍 孙祥明 张元兴
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《中国生物制品学杂志》  2012
关键词:固相pH梯度等电聚焦电泳  载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳  促红细胞生成素  糖基化  
摘要:目的建立一种用于促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)糖基化分析的更灵敏、更稳定的检测方法。方法比较固相pH梯度与载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳在灵敏度及EPO糖基化分析上的差异,并考察固相pH梯度等...
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过量表达XBP1对于重组CHO细胞中HBsAg分泌的影响被引量:1收藏 分享
作者:赵建兵 易小萍 张元兴 孙祥明
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2010
关键词:XBP1  HBsAg  CHO细胞  内质网压力  二硫键  
摘要:考察了过量表达CHO细胞的内源性XBP1(X-box binding protein 1)对于重组CHO细胞中乙肝表面抗原(HBsAg)分泌的影响。结果表明:XBP1无法改善DMSO作用下CHO细胞中HBsAg的分泌,但...
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基于在线拉曼和在线活细胞检测的PAT控制PRV疫苗智能生产工艺研究被引量:0收藏 分享
作者:王楠 闵瑞 易小萍 张大鹤
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;苏州沃美生物有限公司
来源:《中国生物工程杂志》  2024
关键词:伪狂犬病毒  多元数据分析  低葡萄糖和谷氨酰胺浓度  过程分析技术  在线拉曼检测  
摘要:减少乳酸和氨积累一直是动物细胞培养的一个目标,保持培养过程中较低浓度葡萄糖和谷氨酰胺的工艺控制法是最便捷和高效的优化策略。基于在线拉曼检测技术和比例-积分-微分(proportional-integral-derivat...
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鸡乳酸脱氢酶A基因突变对DF-1细胞能量代谢和法氏囊病毒增殖的影响被引量:0收藏 分享
作者:李祥超 易小萍
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2023
关键词:能量代谢  糖酵解  GgLDHA基因  DF-1细胞  IBDV  CRISPR/Cas9系统  
摘要:通过启动子优化构建了适用于DF-1细胞的CRISPR载体;随后通过同时共转靶向GgLDHA的2条sgRNAs,获得了13株GgLDHA基因突变型细胞株,其蛋白表达水平和酶活出现不同程度的下降。通过对突变克隆细胞株生长、葡...
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表达vWF蛋白的重组BHK细胞的无血清培养被引量:0收藏 分享
作者:易小萍 孙祥明 张元兴
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2004
关键词:BHK细胞  rec-vWF  无血清培养基  细胞培养  
摘要:采用HADAMARD统计设计方法建立了适于重组BHK细胞培养和vWF蛋白表达的无血清培养基SFMA。用SFMA进行重组BHK细胞的批培养,细胞生长明显优于有血清培养(DMEM+FBS(φFBS=0.05))和无血清培养基...
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鼠源抗过敏融合蛋白的瞬时表达及纯化被引量:0收藏 分享
作者:程露 易小萍 孙祥明 张元兴
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海富莼科芯生物技术有限公司
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2011
关键词:融合蛋白  瞬时基因表达  中国仓鼠卵巢细胞  过敏  
摘要:采用流加和降温培养工艺,实现在5 L搅拌式生物反应器规模的瞬时基因表达。首先比较了两种表达载体在CHO-S细胞中的瞬时基因表达,发现pID-mAAFP载体介导的瞬时转染表达可以获得mAAFP的高水平表达。采用pID-mA...
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二甲基亚砜作用下重组CHO细胞胞内乙型肝炎表面抗原的定位被引量:0收藏 分享
作者:马浙永 易小萍 张元兴
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《中国生物工程杂志》  2008
关键词:细胞培养  CHO细胞  HBsAg  电镜  
摘要:在培养环境中添加二甲基亚砜(DMSO)能分别提高重组CHO细胞乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的产量和比生产速率70%和3.2倍以上,但同时发现胞内HBsAg的积累量是对照组的7.2倍。为了分析胞内HBsAg积累的区域,采...
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EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体的构建及其转染COS-7细胞条件的优化被引量:0收藏 分享
作者:任培君 易小萍 张元兴
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《中国生物制品学杂志》  2008
关键词:EGFP基因  PDGFRB基因  融合表达  COS-7细胞  转染  
摘要:目的构建EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体,并优化PEI介导基因转染COS-7细胞的条件。方法PCR扩增EGFP和PDGFRβ基因,依次连接至pcDNA3.1(+)质粒中,构建融合基因表达载体H-E-P-pcDNA3...
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外源PDI基因导入CHO细胞及其对HBsAg分泌的影响被引量:0收藏 分享
作者:蔡振荣 易小萍 张元兴
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《生物技术通报》  2009
关键词:细胞培养  CHO细胞  HBsAg  PDI  DMSO  
摘要:在前期的研究工作中发现,当培养基中添加1.5%DMSO(二甲基亚砜)会使CHO细胞的HBsAg(乙肝表面抗原)产量提高80%以上。与此同时,DMSO引起了HBsAg在细胞胞内的大量积累,其含量提高了8倍。同时,DMSO引...
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基于PAT的PCV2 VLPs生产过程优化与控制研究被引量:0收藏 分享
作者:化磊召 易小萍 储炬 庄英萍 张嗣良
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《中国生物工程杂志》  2018
关键词:VLPs  昆虫细胞-杆状病毒载体表达系统  PAT  
摘要:昆虫细胞-杆状病毒载体表达系统(baculovirus expression vector system,BEVS)是病毒样颗粒亚单位疫苗(virus like particles,VLPs)的理想生产平台。动物细胞培养...
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表达重组蛋白的CHO-GS细胞的无血清培养被引量:0收藏 分享
作者:张芳 张立 易小萍 孙祥明 张元兴
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《高技术通讯》  2005
关键词:重组蛋白  HADAMARD  DMEM/F12  无血清培养基  谷氨酰胺  蛋白表达  细胞生长  细胞密度  统计方法  低分子量  添加浓度  外源蛋白  分批培养  CHO  多聚糖  葡聚糖  牛血清  GS  硫酸  转瓶  
摘要:采用DOEHLERT和HADAMARD统计方法建立了一个适于重组CHO-GS细胞生长和外源蛋白表达的无谷氨酰胺无血清培养基SFMB.对多种硫酸多聚糖进行了考察,选取低分子量硫酸葡聚糖,添加浓度为25 mg/L,可以避免细...
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细胞剪切耐受性检测装置的设计、模拟及验证被引量:0收藏 分享
作者:王晗 夏建业 张大鹤 易小萍 庄英萍
机构:华东理工大学生物工程研究中心
来源:《化学工程》  2015
关键词:流体动力学  细胞黏附力  能量耗散率  微载体培养  
摘要:针对动物细胞培养过程中流场作用力对其的制约作用,文中借助计算流体力学的方法设计了一种新型的微流道装置。在该装置内可以产生分布均一而恒定的流场剪切力,并且大小与装置内液体的流速密切相关;同时本次研究采用了微尺度的粒子图像测...
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