成果/Result
- 同时利用AOX1和GAP启动子表达SAM合成酶促进重组毕赤酵母中S-腺苷甲硫氨酸积累被引量：21收藏
- 作者：吕中原 钱江潮 储炬 郭美锦 王永红 庄英萍 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《工业微生物》 2008
- 关键词：双表达单元 SAM合成酶 Pichia pastoris
- 摘要：利用重组毕赤酵母(Pichia pastoris)强化表达S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl methionine,SAM)合成酶(SAM synthetase,SAMS),发酵生产SAM时,胞内SAMS活性和ATP...
- 下载全文在线阅读
- 龟裂链霉菌zwf2基因阻断提高土霉素生物合成被引量：15收藏
- 作者：刘志勇 郭美锦 钱江潮 庄英萍 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《微生物学报》 2008
- 关键词：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 zwf2 龟裂链霉菌M4018 土霉素生物合成
- 摘要：葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)是链霉菌磷酸戊糖途径中第一个酶("看家"酶),也是形成NADPH的关键酶,由zwf1和zwf2基因编码。以温敏型质粒pKC1139为基础构建了用于阻断龟裂链霉菌zwf2的重组质粒pKC...
- 下载全文在线阅读
- MTT法测定人表皮癌细胞的抗药性被引量：15收藏
- 作者：钱江潮 魏东芝 陈笑岚 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2000
- 关键词：MTT法 多药抗性 肿瘤 化疗药物
- 摘要：在用ＭＴＴ测定细胞存活率以研究人表皮癌细胞ＫＢ－３－１ 及其抗阿霉素细胞株ＫＢ－Ａ－１对化疗药物阿霉素、长春花碱和秋水仙碱的多药抗性时，发现培养基中血清浓度的变化对ＭＴＴ法测定结果有影响。吸光值在血清浓度为ｗ ＝ ０．０...
- 下载全文在线阅读
- 肌苷和鸟苷生产菌中嘌呤核苷合成途径三段基因序列的分析被引量：9收藏
- 作者：钱江潮 蔡显鹏 储炬 庄英萍 张嗣良 姚泉洪 彭日荷
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海市农业科学院生物中心
- 来源：《微生物学报》 2003
- 关键词：肌苷 鸟苷 生物合成 基因序列分析 细菌
- 摘要：为了研究肌苷和鸟苷生产菌中与产苷有关的嘌呤核苷合成途径的遗传背景 ,选择了pur操纵子的启动子序列、编码SAMP合成酶的purA基因和编码GMP合成酶的guaA基因 ,设计合适的引物 ,分别从野生菌、一株肌苷低产菌和肌苷...
- 下载全文在线阅读
- 不同拷贝数及间隔肽序列对毕赤酵母分泌表达EXA的影响被引量：7收藏
- 作者：王晖 钱江潮 庄英萍 储炬 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2008
- 关键词：间隔肽 exendin-4类似物 多拷贝串联 毕赤酵母 分泌表达
- 摘要：通过多拷贝串联表达，以及在分泌信号序列和目的蛋白N端之间插入几个氨基酸的间隔短肽，以提高exendin-4类似物串联体EXA在重组毕赤酵母中的分泌表达水平。实验结果表明：2～5个EXA串联插入均比单个EXA插入有利于提高...
- 下载全文在线阅读
- ^(13)CMFA过程中GC-MS分析菌体蛋白氨基酸的^(13)C标记丰度被引量：7收藏
- 作者：王建 王泽建 黄明志 钱江潮 储炬 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室/国家生化工程技术研究中心
- 来源：《中国生物工程杂志》 2009
- 关键词：^13C代谢通量分析 菌体蛋白氨基酸 氨基酸衍生化 气相色谱-质谱 ^13C标记丰度信息
- 摘要：基于13C标记的代谢通量分析(13CMFA)由于具有准确性和应用性已成为国际上代谢工程研究的热点,其中一个至关重要的问题就是分析菌体蛋白氨基酸的13C标记丰度信息。用含20%全标记葡萄糖([U-13C])和80%天然葡萄...
- 下载全文在线阅读
- 葡萄糖氧化酶在毕赤酵母中的高效分泌表达被引量：6收藏
- 作者：魏东升 段广东 钱江潮
- 机构：华东理工大学生物反应器国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2021
- 关键词：葡萄糖氧化酶 毕赤酵母 分泌表达
- 摘要：为了获得高效分泌表达葡萄糖氧化酶(GOD)的毕赤酵母,采用黑曲霉来源的GOD基因序列,按照毕赤酵母的密码子偏好性进行优化,构建AOX1启动子诱导的分泌表达载体pPIC9K-GOD和重组菌G/GOD,通过提高遗传霉素G41...
- 下载全文在线阅读
- 甲醇浓度和VHb蛋白表达对重组毕赤酵母生产SAM的影响被引量：5收藏
- 作者：王永强 钱江潮 储炬 郭美锦 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2008
- 关键词：甲醇浓度 S-腺苷甲硫氨酸 透明颤菌血红蛋白 ATP 细胞活性
- 摘要：以插入AOX1启动子调控S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶/VHb表达单元的重组毕赤酵母为对象,研究了甲醇浓度及vgb表达对菌体生长、SAM产量及SAM合成酶活力的影响,同时也考察了vgb表达对胞内ATP含量及细胞活性的影...
- 下载全文在线阅读
- 采用高效液相色谱测定红霉素发酵液组分被引量：4收藏
- 作者：齐霞昌 陈昌发 钱江潮 储炬 庄英萍 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《食品与发酵工业》 2009
- 关键词：HPLC 发酵液 红霉素组分 冷冻干燥
- 摘要：建立了测定发酵液中红霉素组分的高效液相色谱法。借鉴常用的红霉素成品高效液相分析方法,对流动相的缓冲液系统进行了优化,发现以(0.025mol/LK2HPO4)∶(乙腈)=60∶40作为流动相,红霉素A、B、C组分能够达到...
- 下载全文在线阅读
- 反义寡核苷酸-萘二酰亚胺偶联物对多药耐药性肿瘤细胞的抑制作用被引量：3收藏
- 作者：李军生 魏东芝 周宇荀 钱江潮 朱冬晖 张元兴
- 机构：华东理工大学生物反应器国家重点实验室
- 来源：《癌症》 2001
- 关键词：反义寡核苷酸 化学修饰 反义寡核苷酸-萘二酰亚胺偶联物 多药耐药性 抑制 肿瘤细胞
- 摘要：目的：针对人表皮癌细胞阿霉素耐药株（ KB- A- 1）的多药耐药性问题，探讨天然反义寡核苷酸与寡核苷酸－萘二酰亚胺偶联物对多药耐药性肿瘤细胞的抑制作用及 mdr1基因表达的影响。方法：利用 S－烷基化反应成功地合成了反...
- 下载全文在线阅读
- 重组工业红色糖多孢菌优化红霉素发酵液组分被引量：2收藏
- 作者：李学志 钱江潮 陈云 杭海峰 储炬 庄英萍 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《中国抗生素杂志》 2009
- 关键词：红霉素 组分 重组菌 发酵
- 摘要：本文对代谢工程改造红色糖多孢菌ZL1004进行了摇瓶发酵试验,摇瓶发酵结束时重组菌红霉素生物效价与工业生产菌HL3168相比提高20%,红霉素A组分比例由84%提高到94%,红霉素A浓度3.98mg/ml,相比出发菌3....
- 下载全文在线阅读
- 阻断消耗途径提高毕赤酵母工程菌S-腺苷甲硫氨酸产量被引量：2收藏
- 作者：苏慧颖 蒙世拯 赵欣欣 钱江潮 储炬 秦秀林
- 机构：广西大学生命科学与技术学院、亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室、广西微生物与酶工程技术研究中心;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《微生物学通报》 2023
- 关键词：S-腺苷甲硫氨酸 毕赤酵母 S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 L-甲硫氨酰tRNA合酶
- 摘要：【背景】S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)作为所有生物体内的重要中间代谢物,不仅可作为膳食补充剂,还具有良好的临床应用价值。【目的】将毕赤酵母重组菌GS115/DS16的SAM消耗...
- 下载全文在线阅读
- 优化易错PCR条件以提高毕赤酵母GAP启动子文库突变效率被引量：2收藏
- 作者：秦秀林 钱江潮 储炬
- 机构：广西大学生命科学与技术学院;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物技术通报》 2014
- 关键词：易错PCR 突变效率 随机突变 毕赤酵母 GAP启动子
- 摘要：高效的随机突变策略对于构建含有丰富突变体的启动子文库至关重要。为了建立一个突变率适中并能获得较多有益突变子的易错PCR(error-prone PCR,EP-PCR)条件,实现毕赤酵母GAP启动子的高效突变,对EP-PC...
- 下载全文在线阅读
- 低氧诱导启动子PsADH2在毕赤酵母中的调控特性被引量：2收藏
- 作者：乔雪锋 陆俊杰 肖慈英 储炬 钱江潮
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2013
- 关键词：PsADH2启动子 低氧诱导 透明颤藻血红蛋白 毕赤酵母
- 摘要：树干毕赤酵母(Pichia stipitis)乙醇脱氢酶Ⅱ(Alcohol dehydrogenaseⅡ)基因PsADH2的启动子是低氧诱导型启动子。利用透明颤藻血红蛋白(VHb)基因vgb、绿色荧光蛋白(GFP)基因g...
- 下载全文在线阅读
- 利用间隔肽促进S-腺苷甲硫氨酸合成酶在毕赤酵母中的分泌表达被引量：2收藏
- 作者：秦秀林 钱江潮 储炬
- 机构：广西大学生命科学与技术学院;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物技术通报》 2013
- 关键词：S-腺苷甲硫氨酸合成酶 分泌表达 毕赤酵母 间隔肽 异源表达
- 摘要：S-腺苷甲硫氨酸(SAM)是所有生物体中都存在的一种重要分子,对维持生物体功能具有重要的作用,已经被广泛地用于治疗肝脏疾病、关节炎和忧郁症等多种疾病。利用巴斯德毕赤酵母KM71构建基因工程菌K/9KM,在AOX1启动子调...
- 下载全文在线阅读
- 微生物学全英文教学的意义、问题以及促研促教的实践探索被引量：2收藏
- 作者：黄娇芳 童阿康 罗远婵 钱江潮 吴辉 王启要 庄英萍
- 机构：华东理工大学生物工程学院
- 来源：《生物工程学报》 2022
- 关键词：微生物学 课程改革 英文教学 促研促教 实践探索
- 摘要：微生物涉及人类生活的方方面面,微生物学是各类高校为生命科学、医学、药学、农业、林业、食品等有关专业开设的本科生必修专业基础课。在国际化和一流学科发展趋势下,全英文授课具有重要意义并越来越受到重视。本文旨在探讨在如今面向人...
- 下载全文在线阅读
- 内源信号肽DSE4介导头孢菌素C酰化酶在毕赤酵母中的分泌表达被引量：2收藏
- 作者：丁璐妹 肖慈英 储炬 钱江潮 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2015
- 关键词：毕赤酵母 分泌表达 DSE4信号肽 头孢菌素C酰化酶 β-半乳糖苷酶
- 摘要：头孢菌素C(CPC)酰化酶可用于一步酶法合成7-氨基头孢烷酸(7-ACA)。对来自Pseudomonas sp.Strain SE83的高活性CPC酰化酶突变基因进行基于毕赤酵母偏好密码子优化,获得基因SECA。选取毕赤...
- 下载全文在线阅读
- 大肠杆菌表达高性能融合鱿鱼环齿-类弹性蛋白的发酵优化被引量：1收藏
- 作者：姜正日 殷仁凯 王泽建 钱江潮
- 机构：华东理工大学生物工程学院
- 来源：《华东理工大学学报(自然科学版)》 2024
- 关键词：大肠杆菌 鱿鱼环齿蛋白 类弹性蛋白 力学性能 发酵优化
- 摘要：为了实现重组蛋白SRT-ELP36在大肠杆菌中的高效表达,利用携带重组蛋白SRTELP36基因的pET-25b(+)表达载体,分别在摇瓶和5 L发酵罐上进行了发酵条件优化,并在50 L发酵罐中进行放大验证。经转化表达质粒...
- 下载全文在线阅读
- 酶法测定卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性被引量：1收藏
- 作者：钱江潮 龚邦强 曹进新 张嗣良
- 机构：华东理工大学国家生化工程技术研究中心;上海医药集团总公司
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2003
- 关键词：卵磷脂胆固醇酰基转移酶 LCAT 酶活测定 药物筛选 胆固醇 逆向运输 测定方法
- 摘要：催化血浆中游离胆固醇酯化反应的卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)是胆固醇逆向运输过程中的关键酶之一。本研究针对原测定方法中本底过高的问题,改变了对照本底的反应条件,使原反应体系中的前两步酶反应无法进行,最终测得的反应速率...
- 下载全文在线阅读
- 反义核酸对肿瘤细胞多药抗性的抑制——作用靶点及作用方式的研究被引量：1收藏
- 作者：钱江潮 魏东芝 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2000
- 关键词：多药抗性 反义核酸 肿瘤细胞 化疗药物 抑制
- 摘要：为了用反义寡聚 DNA调控抗阿霉素肿瘤细胞 KB- A- 1的多药抗性 ,对反义核酸的预期作用位点、作用方式和硫代化类似物进行了研究。筛选得到两段对应于翻译起始区 ( 3)和 P-糖蛋白ATP结合位点 ( 9)的 2 0...
- 下载全文在线阅读
- 供氧对红霉素基因工程菌ZL1004发酵液组分的影响被引量：1收藏
- 作者：陈昌发 齐霞昌 钱江潮 庄英萍 储炬 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《中国抗生素杂志》 2009
- 关键词：红霉素 组分 基因工程菌 羟基化酶 Eryk
- 摘要：本文研究了供氧条件对红霉素基因工程菌ZL1004发酵液组分的影响。摇瓶条件下考察了不同形式的摇床和摇瓶装液量对发酵液组分的影响,发现供氧能力好的双层敞开旋转摇床有利于组分改善,发酵终点时发酵液中有效组分A为93.93%,...
- 下载全文在线阅读
- 人表皮癌细胞膜表面 P糖蛋白的ELISA法检测被引量：1收藏
- 作者：钱江潮 魏东芝 陈笑岗 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所
- 来源：《上海免疫学杂志》 1999
- 关键词：ELISA 多药抗性 P糖蛋白 人表皮癌细胞膜
- 摘要：为了用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测细胞表面 Ｐ 糖蛋白（ Ｐｇｐ ） 的表达量， 就反应条件、单抗浓度、二抗稀释度进行了试验。用经过优化的条件（０２μｇ／ｍｌ 单抗 Ｃ２１９ ， ４ ℃反应过夜； 酶标二抗按１ ： ２...
- 下载全文在线阅读
- 共表达PDI1、MDH1和HAC1基因对重组毕赤酵母分泌表达葡糖氧化酶的影响被引量：0收藏
- 作者：张文玉 魏东升 钱江潮
- 机构：华东理工大学生物反应器国家重点实验室
- 来源：《中国生物工程杂志》 2019
- 关键词：重组毕赤酵母 葡糖氧化酶 HAC1基因 PDI1基因 MDH1基因
- 摘要：葡糖氧化酶(GOD)可催化葡萄糖生成过氧化氢和葡萄糖酸,在工业上被广泛应用。在构建的一株整合多拷贝GOD基因且含有HAC1表达单元的重组毕赤酵母G/GMH1的基础上,共表达分子伴侣二硫键异构酶基因PDI1和苹果酸脱氢酶基...
- 下载全文在线阅读
- Co^(2+)对红霉素重组工程菌ZL1004发酵过程的影响被引量：0收藏
- 作者：尚永崇 钱江潮 黄明志 储炬 庄英萍 张嗣良 李万钧
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;宜都东阳光生化制药有限公司
- 来源：《中国抗生素杂志》 2010
- 关键词：红霉素 Co2+ 重组工程菌 组分
- 摘要：在50L发酵罐上考察了重组工程菌ZL1004的组分情况,与出发菌相比,A组分由75.43%上升到87.85%,B组分由4.42%下降到0.45%,C组分由13.35%下降到1.70%,而首次关注的红霉素E和F含量,却分别...
- 下载全文在线阅读
- 优化甲硫氨酸补料策略提高重组毕赤酵母G12-CBS合成S-腺苷甲硫氨酸被引量：0收藏
- 作者：武晓乐 秦秀林 姚高峰 储炬 钱江潮
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2012
- 关键词：毕赤酵母 S-腺苷甲硫氨酸 甲硫氨酸
- 摘要：重组毕赤酵母G12-CBS经代谢工程改造,可高效表达重组S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶,并弱化了SAM转化途径的关键酶β-胱硫醚合成酶,是一株优良的SAM高产菌。为了利用G12-CBS高效合成SAM,需对前体(甲硫氨酸...
- 下载全文在线阅读
- 理性设计提高末端脱氧核苷酸转移酶在大肠杆菌中的可溶性表达被引量：0收藏
- 作者：吴亚松 王泽建 钱江潮
- 机构：华东理工大学生物工程学院
- 来源：《华东理工大学学报(自然科学版)》 2025
- 关键词：末端脱氧核苷酸转移酶 理性设计 疏水性氨基酸 可溶性表达 大肠杆菌
- 摘要：末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase,TdT)是一种非模板依赖性的DNA聚合酶,可催化DNA的从头合成,具有重要的应用价值。为提高重组TdT在大肠杆菌中的可溶性...
- 下载全文在线阅读
- 人表皮癌细胞在裸鼠体内的移植被引量：0收藏
- 作者：钱江潮 朱冬晖 魏东芝
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2000
- 关键词：裸小鼠 动物疾病模型 表面癌细胞 移植 化疗药物
- 摘要：将人表皮癌细胞 KB- 3- 1及其阿霉素抗性细胞 KB- A- 1接种于裸小鼠 BALB/c- nu前肢左腋下 ,经 8～ 9d的潜伏期 ,在小鼠左前肢长出肿瘤 ,建立了裸小鼠人表皮癌模型。
- 下载全文在线阅读
