成果/Result
- 巴斯德毕赤酵母的基因表达系统研究进展被引量：130收藏
- 作者：欧阳立明 张惠展 张嗣良 刘志敏
- 机构：华东理工大学生物工程学院;军事医学科学院生物工程研究所
- 来源：《生物化学与生物物理进展》 2000
- 关键词：巴斯德毕赤酵母 基因表达系统 载体 受体
- 摘要：巴斯德毕赤酵母是一种近年来广泛使用的基因表达系统 ,它具有表达率高、遗传稳定、产物可分泌、发酵工艺成熟等许多优点 .综述了该系统在载体类型、载体元件 (包括启动子、选择标记和信号肽序列 )、受体类型。
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- 过程启发式教学在基因组学课程中的实践被引量：23收藏
- 作者：欧阳立明 肖君华 张惠展
- 机构：华东理工大学生物工程学院
- 来源：《微生物学通报》 2006
- 关键词：基因组学 过程启发式教学 讨论
- 摘要：基因组学是生物科学专业的一门高级专业课,前沿性强。总结了对基因组学课程应用过程启发式教学方针进行教学的经验,包括激发学习兴趣,实施讨论式教学,教学内容模块化和灵活化等。实践证明,这些措施能大大提高学生学习的自主性和积极性...
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- 弱氧化葡糖杆菌ddsA基因在大肠杆菌不同宿主菌中的表达被引量：15收藏
- 作者：范怡 刘欣毅 陈国豪 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《工业微生物》 2002
- 关键词：弱氧化葡糖杆菌 ddsA基因 大肠杆菌 宿主菌 表达 聚十异戊烯焦磷酸合成酶 辅酶Q10
- 摘要：泛醌 (辅酶Q)在生物体氧化呼吸链中作为重要的质子和电子传递物质。聚十异戊烯焦磷酸合成酶催化辅酶Q10 的侧链的生物合成。为了获得高产辅酶Q10 的菌株 ,将选择了 10种不同大肠杆菌宿主菌用于弱氧化葡糖杆菌的聚十异戊烯...
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- ubiCA基因的强化表达及对大肠杆菌辅酶Q生物合成的影响被引量：15收藏
- 作者：叶江 马林 吴海珍 刘欣毅 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2006
- 关键词：大肠杆菌 ubiCA 基因克隆 强化表达 辅酶Q
- 摘要：为调查大肠杆菌高产辅酶Q(CoQ)的可能性,首先研究大肠杆菌生物合成关键基因ubiCA强化表达对大肠杆菌CoQ产量的影响。本文构建了含有ubiCA基因的5个表达质粒,将其分别转入E.coli JM 83或BL 21(DE...
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- 基因组学课程体系与教学实践被引量：12收藏
- 作者：欧阳立明 张惠展
- 机构：华东理工大学生物工程学院
- 来源：《遗传》 2011
- 关键词：基因组学 生物科学 课程体系 教学 创新实验
- 摘要：基因组学是现代生命科学"组学"理论体系和研究方法中的核心,其教学存在内容多、难点多、进展快、对英文基础和前修课程知识要求高等特点。作者根据自身教学实践提出了适于生物科学本科专业教学的课程体系和经验体会,强调通过启发式思考...
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- 林可霉素生物合成基因lmbU的敲除及其遗传回补被引量：9收藏
- 作者：吕彩霞 杨捷 叶江 吴海珍 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2008
- 关键词：同源重组 敲除 遗传回补 林可霉素生物合成
- 摘要：利用DNA同源重组原理敲除S.lincolnensisNRRL 2936中lmbU基因,筛选获得该基因缺陷株S.lincolnensisJLUa2,其不具备林可霉素生物合成能力。利用构建的不同重组质粒转化缺陷株,发现含有...
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- 基因替换及多基因共表达强化大肠杆菌辅酶Q_(10)的合成能力被引量：8收藏
- 作者：傅楠 叶江 吴海珍 孔璐 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2008
- 关键词：大肠杆菌 基因缺失 多基因共表达 辅酶Q
- 摘要：为了强化大肠杆菌合成辅酶Q10(CoQ10)的能力,对大肠杆菌进行了相关的基因操作。通过敲除大肠杆菌染色体上的聚八异戊二烯焦磷酸合成酶基因ispB,并导入来自Gluconobactersuboxydans的聚十异戊二烯焦...
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- 荚膜红细菌接合转移系统的建立及优化被引量：8收藏
- 作者：吴海珍 李莉 张惠展 刘和
- 机构：华东理工大学生物工程学院;苏州第四制药厂
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2000
- 关键词：接合转移 接合效率 培养 优化 荚膜红细菌
- 摘要：从培养方式及培养时间对光合细菌Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ ｃａｐｓｕｌａｔｕｓ的ＤＮＡ 接合转移系统进行了优化，研究了该接合转移系统的部分特性，发现接合质粒的大小、受体菌细胞膜的特性对接合效率影响较明显，这为光合细菌基因工程...
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- 大肠杆菌ispB基因的克隆及鉴定被引量：7收藏
- 作者：周雪峰 吴海珍 范怡 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《工业微生物》 2001
- 关键词：ispB基因 重组质粒 基因文库 MC4100 鸟枪法 大肠杆菌 基因克隆
- 摘要：ispB基因编码八聚异戊二烯焦磷酸合成酶 ,是决定大肠杆菌CoQ8生物合成的关键因子。克隆ispB基因是构建产辅酶Q10 基因工程菌的前提。本实验从野生型大肠杆菌MC4 10 0出发 ,以 pUC18为载体 ,构建了大肠...
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- 林可链霉菌转化系统的建立被引量：7收藏
- 作者：张惠展 姚峰 叶江
- 机构：华东理工大学生化工程系微生物教研室
- 来源：《微生物学报》 1999
- 关键词：林可链霉菌 原生质体再生 转化
- 摘要：利用基因工程技术改良抗生素生产菌有着广阔的应用前景［１］。值得尝试的是将抗生素生物合成基因片段随机或定向组合导入生产菌中，通过同源重组方式提高生物合成途径中限速步骤相关基因的剂量，以达到提高生产菌发酵单位的目的。此战略被...
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- 大肠杆菌莽草酸生物合成途径的基因操作被引量：6收藏
- 作者：杨捷 钱晋 叶江 吴海珍 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2009
- 关键词：莽草酸 基因敲除 强化表达 发酵
- 摘要：为了调查大肠杆菌中相关基因的遗传操作对莽草酸途径和莽草酸积累的影响,利用温度敏感型质粒敲除了大肠杆菌JM83染色体DNA上编码莽草酸激酶的aroL基因,获得了该基因缺陷株JDL02;同时从大肠杆菌JM83染色体中分别克隆...
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- 氧化葡萄糖杆菌ddsA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：5收藏
- 作者：张安 吴海珍 周雪峰 张惠展 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2002
- 关键词：氧化葡萄糖杆菌 ddsA基因 克隆 大肠杆菌 表达
- 摘要：聚十异戊烯焦磷酸合成酶催化异戊烯二磷酸与丙烯基二磷酸发生连续的缩合反应生成聚十异戊烯焦磷酸 ,构成辅酶 Q1 0 的侧链。将氧化葡糖杆菌 ( Gluconobacter oxydans)的染色体 DNA用 Eco RI酶...
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- 分子生物学全英文课程建设的探索与实践被引量：4收藏
- 作者：陈雨蒙 蔡孟浩 吴海珍 范立强 赵健 张惠展 范建华
- 机构：华东理工大学生物工程学院应用生物学系
- 来源：《中国生物化学与分子生物学报》 2024
- 关键词：全英文授课 分子生物学 课程建设 专业英语
- 摘要：“分子生物学”是普通高等院校生物类相关专业的核心课。随着“双一流”建设、一流本科建设等政策的推进,全英文课程建设面对机遇与挑战。华东理工大学2019年首次开设《分子生物学全英文》课程,对课程建设进行了改革和实践,包括形象...
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- 红色糖多孢菌红霉素抗性基因的克隆与鉴定被引量：3收藏
- 作者：孙丽萍 沈琼 叶江 吴海珍 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2002
- 关键词：鸟枪法 原生质体转化 红色糖多孢菌 红霉素抗性基因 双重抗性筛选 基因克隆 基因鉴定
- 摘要：将红色糖多孢菌 ( Saccharopolyspora erythraea)的染色体 DNA用 Pst I酶切后与载体p UWL2 0 1连接 ,转化变铅青链霉菌 ( S.lividans) TK2 3的原生质体。采用双...
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- 藤黄微球菌海藻糖生物合成基因的克隆与鉴定被引量：3收藏
- 作者：黄雪锋 欧阳立明 吴海珍 叶江 张惠展 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物工程学院
- 来源：《微生物学通报》 2006
- 关键词：藤黄微球菌 海藻糖 低聚麦芽糖苷基海藻糖合成酶(MTSase) 低聚麦芽糖苷基海藻糖水解酶(MTHase) 同源性分析
- 摘要：首次从一株能利用淀粉产生海藻糖的藤黄微球菌中克隆了海藻糖生物合成基因。采用PCR方法结合非随机鸟枪法得到藤黄微球菌中低聚麦芽糖苷基海藻糖合成酶(MTSase)基因(MtreY)的全序列及低聚麦芽糖苷基海藻糖水解酶(MTH...
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- 三苯甲基保护的巯烷臂寡核苷酸的合成及荧光标记被引量：3收藏
- 作者：魏欣 张惠展 黎占亭 姚伟 钱旭红
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;中国科学院上海有机化学研究所;华东理工大学精细化工系
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2001
- 关键词：寡核苷酸探针 亚磷酰胺 巯基臂 荧光标记 固相合成法 三苯甲基保护 lmol基因
- 摘要：用三苯甲基巯基乙醇与氯化甲氧基吗啡啉亚磷酰胺连接得到一种亚磷酰胺试剂 ( III)。用该试剂通过固相合成仪合成了 5′末端巯烷基修饰的寡核苷酸 ,用 Ag+ 脱去巯基的三苯甲基保护后与 ω-碘己基修饰的荧光基团反应 ,得...
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- 林可链霉菌中的同源重组被引量：3收藏
- 作者：唐雅珺 吴海珍 叶江 张惠展
- 机构：华东理工大学国家生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《微生物学报》 2001
- 关键词：林可链霉菌 同源重组 同源整合 同源交换 抗生素生产菌
- 摘要：为研究链霉菌中的同源整合频率和机制 ,采用不能在链霉菌中复制的大肠杆菌质粒转化链霉菌StreptomyceslincolnensisB48。质粒pYYE0 4a1上携带的被硫链丝菌素抗性基因灭活的林可霉素生物合成基因与染...
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- 大肠杆菌腺苷脱氨酶基因的克隆、表达与缺失被引量：2收藏
- 作者：钱红亮 曾洋 叶江 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 分子克隆实验室
- 来源：《微生物学报》 2002
- 关键词：腺苷脱氨酶 ATP 基因缺失 代谢途径 基因工程 克隆 表达 途径工程
- 摘要：利用途径工程的基本原理 ,拟在大肠杆菌核苷酸代谢途径中构建腺苷 (AR)转化为腺苷三磷酸 (ATP)的新途径 ,故需使细胞内的腺苷脱氨酶基因 (add)缺失。通过构建大肠杆菌MC41 0 0DNA的基因文库 ,筛选得到含...
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- 一种新型的基因定点突变方法及其在DdsA突变研究中的应用被引量：2收藏
- 作者：刘欣毅 张惠展 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物工程学院
- 来源：《中国生物化学与分子生物学报》 2007
- 关键词：基因突变 平端酶切位点 定点突变 DdsA变体
- 摘要：为了发展基因突变技术,介绍一种新型的基因定点突变方法.该方法巧妙利用了基因序列中广泛存在的不完整的平端酶切位点.与传统方法相比,可以迅速地在全基因的任何部位替换核苷酸,并可以在突变实验过程中直接将目的基因克隆到T载体上,...
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- Rif-orf13编码的细胞色素P450催化利福霉素生物合成过程中C34a位的羟化反应（英文）被引量：2收藏
- 作者：周强 罗光彩 张惠展 唐功利
- 机构：华东理工大学生物工程学院;中国科学院上海有机化学研究所
- 来源：《有机化学》 2019
- 关键词：细胞色素P450 羟化反应 利福霉素 rif-orf13
- 摘要：利福霉素生物合成途径在经历了二十余年的研究之后,仍然没有得到完全阐明.其中C34a甲基的氧化脱除是利福霉素成熟过程中的必需反应步骤,但是催化这一步骤的酶尚未鉴定·推测可能是利福霉素生物合成基因簇编码的某个细胞色素P450...
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- yigP——大肠杆菌生长所必需的基因被引量：2收藏
- 作者：李月 傅楠 叶江 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2011
- 关键词：yigP 大肠杆菌 基因敲除 功能回补
- 摘要：yigP基因在大肠杆菌基因组上位于辅酶Q生物合成相关基因ubiE和ubiB之间,3者构成一个操纵子。利用温敏质粒pMAK705系统敲除大肠杆菌基因组上的yigP基因后,发现二次重组子内的温敏质粒无法通过高温培养丢失,即染...
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- 改进的PCR法克隆带小棒链霉菌cefD基因被引量：2收藏
- 作者：张虹 蒋亚琴 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2002
- 关键词：PCR法 克隆 带小棒链霉菌 cefD 基因
- 摘要：以 GC含量高达 74%的带小棒链霉菌 ( S.clavuligerus)染色体 DNA为模板 ,从引物设计、退火温度、有机辅剂及 DNA聚合酶等方面改善 PCR反应体系和扩增条件 ,成功地克隆得到了异青霉素异构酶的 c...
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- 迟钝爱德华氏菌RNA提取及痕量基因组DNA去除方法探究被引量：2收藏
- 作者：王克平 叶江 张惠展
- 机构：华东理工大学生物工程学院、生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物技术通报》 2012
- 关键词：迟钝爱德华氏菌 RNA 基因组 DNA DNase I RT-PCR
- 摘要：迟钝爱德华氏菌EIB202是一类细胞壁结构特殊的革兰氏阴性菌,高质量RNA提取相对较难。为了从转录组水平研究这类致病菌的致病机理,需要摸索有效的RNA提取及RNA样品中痕量基因组DNA去除方法。对常规RNA提取步骤进行改...
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- 荚膜红细菌十聚异戊二烯焦磷酸合成酶异源表达及纯化的研究被引量：2收藏
- 作者：刘欣毅 张惠展 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;华东理工大学生物工程学院
- 来源：《中国药学杂志》 2007
- 关键词：辅酶Q10 十聚异戊二烯焦磷酸合成酶 融合表达 镍柱纯化
- 摘要：目的构建生产辅酶Q10的大肠杆菌基因工程菌并研究相关酶的表达情况。方法将荚膜红细菌(Rhodobacter capsula-tusB10)中十聚异戊二烯焦磷酸合成酶编码基因ddsA分别克隆在Lac,T7和Trc启动子下游...
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- 对一株藤黄微球菌合成海藻糖能力的鉴定被引量：2收藏
- 作者：欧阳立明 王善利 施超欧 张惠展 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;华东理工大学分析测试中心
- 来源：《微生物学通报》 2004
- 关键词：海藻糖 藤黄微球菌 高效离子色谱
- 摘要：报道了一株藤黄微球菌 (Micrococcusluteus)具有产酶能力 ,可以淀粉糊精为底物合成海藻糖 ,从还原糖含量变化、纸层析和高效阴离子交换
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- 林可链霉菌黑色素生物合成基因的克隆与表达被引量：2收藏
- 作者：张惠展 姚峰 孙丽萍
- 机构：华东理工大学生化工程系
- 来源：《微生物学报》 1998
- 关键词：林可链霉菌 黑色素 DNA序列测定 异源表达
- 摘要：以pIJ702的melCl－C2基因为探针杂交林可链霉菌（Streptomyceslincolnensis）78－11染色体DNA，呈现出3．2kb的BamHI片段和2．6kb的SphI片段等一系列阳性条带。构建了含3．...
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- 抗生素Bagremycin生产菌Streptomyces sp. Tü4128接合转移系统的建立被引量：2收藏
- 作者：朱云霞 廖思懿 叶江 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2012
- 关键词：attB位点 噬菌体φC31 bagremycin 属间接合 Streptomyces sp. Tü4128
- 摘要：基于噬菌体φC31 att/int系统,采用属间接合将来自大肠杆菌的DNA有效地导入菌株Tü4128的孢子中。通过条件优化,当融合温度为37℃时,在含80mmol/L MgCl2的ISP4培养基上使每个受体细胞的接合频率...
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- 基因局部改组技术在ubiA基因突变中的应用被引量：1收藏
- 作者：顾超 傅楠 叶江 张惠展
- 机构：华东理工大学生物工程学院
- 来源：《微生物学报》 2011
- 关键词：ubiA基因 辅酶Q 基因局部改组 温敏质粒
- 摘要：辅酶Q(coenzyme Q,CoQ)作为线粒体呼吸链中的递氢体具有较高的学术及应用价值。由ubiA基因编码的4-羟苯甲酸聚异戊二烯转移酶(UbiA)是大肠杆菌CoQ生物合成途径的限速步骤,但通过系统突变对其结构进行研究...
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- 林可霉素生物合成基因lmbH的回转化被引量：1收藏
- 作者：张长生 张惠展 姚峰 丁建忠
- 机构：华东理工大学生化工程系;苏州第四制药厂基因工程联合研究室
- 来源：《中国抗生素杂志》 1999
- 关键词：基因回转化 同源整合 林可霉素 生物合成
- 摘要：以ｐＩＪ７０２或ｐＩＪ４８６为载体构建了３个含有ｌｍｂＨ基因的重组质粒ｐＥＳＳ７０１、ｐＥＳＳ７０４和ｐＥＳＳ７０８，分别回转化林可霉素产生菌（Ｓ．ｌｉｎｃｏｌｎｅｎｓｉｓ）Ｂ４８，并随机挑选了６００个回转化克隆进行摇瓶...
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- 林可霉素生物合成缺陷的同源重组菌鉴定被引量：1收藏
- 作者：沈琼 吴海珍 唐雅珺 张惠展
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《中国医药工业杂志》 2003
- 关键词：林可霉素 生物合成 同源重组菌 效价 鉴定
- 摘要：以 S.lincolnensis B48为对照 ,分别测定两个染色体上含 lmb I基因灭活拷贝的菌株 YY1(同源交换 )、YY2 (同源整合 )的抗菌效价 ,其中 YY1在其整个生物周期中均无明显抗菌效价 ,而 YY...
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