成果/Result
- 人铜锌超氧化物歧化酶cDNA的克隆、测序及表达被引量：32收藏
- 作者：施惠娟 范立强 魏东芝 袁勤生 孙建新 吴祥甫
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;中国科学院上海生物化学研究所
- 来源：《生物化学与生物物理学报》 1999
- 关键词：表达载体 基因克隆 基因表达 Cu,Zn-SOD
- 摘要：用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ），以人胎肝组织总ＲＮＡ为模板，扩增了人铜锌超氧化物歧化酶（ｈＣｕ，ＺｎＳＯＤ）的ｃＤＮＡ，并进行序列分析，将该ｈＣｕ，ＺｎＳＯＤｃＤＮＡ重组到Ｔ７启动子控制下的分泌型表达载体ｐＥＴ２２ｂ...
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- 虫草及其发酵制品抗氧化能力研究被引量：32收藏
- 作者：顾宇翔 宋聿文 范立强 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物反应器国家重点实验室
- 来源：《中国中药杂志》 2007
- 关键词：抗氧化 冬虫夏草 蛹虫草 发酵
- 摘要：目的:考察天然冬虫夏草、蛹虫草及其发酵制品水和乙醇提取物体外抗氧化活性。方法:测定样品的6个抗氧化指标:抑制亚油酸氧化的能力;清除DPPH自由基、羟自由基、过氧化氢和超氧阴离子的活性以及螯合金属离子(Fe^(2+))的效...
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- 重组人锰超氧化物歧化酶工程菌高效表达培养工艺的研究被引量：21收藏
- 作者：张艳红 廖晓全 范立强 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物工程学院国家重点实验室
- 来源：《中国药学杂志》 2002
- 关键词：重组人锰超氧化物歧化酶 工程菌 培养工艺 rhMn-SOD
- 摘要：目的 确定重组人锰超氧化物歧化酶 (rhMn SOD)工程菌高效表达的最适培养工艺条件。方法 通过摇瓶培养研究了包括接种量、诱导时机、Mn2 + 浓度、诱导后培养时间、发酵过程中 pH变化以及初始 pH值对发酵的影响。 ...
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- 香菇菌糠高温高压-复合酶降解工艺优化及提取物的生物活性被引量：14收藏
- 作者：马冰清 张忠 吴迪 范立强 张春月 周峰 杨焱 赵黎明
- 机构：华东理工大学生物工程学院;上海市农业科学院食用菌研究所
- 来源：《食用菌学报》 2021
- 关键词：香菇菌糠 高温高压-复合酶 抗炎活性 抗氧化活性
- 摘要：采用单因素和响应面实验优化了高温高压-复合酶法处理香菇(Lentinula edodes)废弃菌糠的条件:料液比1∶20(g∶mL),最佳复合酶配比为纤维素酶∶木聚糖酶∶β-葡聚糖酶=3∶2∶1,总加酶量660U·g^(...
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- 人铜锌超氧化物歧化酶cDNA的克隆、表达、发酵及纯化工艺研究被引量：12收藏
- 作者：施惠娟 范立强 陈长华 吴祥甫 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所;中国科学院上海生物化学研究所
- 来源：《中国药学杂志》 1999
- 关键词：铜 锌 超氧化物歧化酶 CDNA 基因克隆
- 摘要：目的：用基因工程的方法获得人铜锌超氧化物歧化酶（ｈＣｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ）的高产菌，通过发酵培养，最后纯化获得大量廉价的高纯度的ｈＣｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ。方法：用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），扩增了人铜锌超氧化物歧化酶（...
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- 钝顶螺旋藻Fe-SOD的纯化及性质被引量：12收藏
- 作者：夏文超 李素霞 范立强 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物工程学院
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2003
- 关键词：Fe-SOD 钝顶螺旋藻 铁型超氧化物歧化酶 纯化 平均比活 稳定性 金属酶
- 摘要：从螺旋藻中分离纯化的Fe-SOD平均比活为4576U/mg,总活力回收率50%,纯度达电泳纯。SDS-PAGE测定纯化的Fe-SOD亚基相对分子质量为21ku,每分子亚基含0.7个Fe原子;在Tris-盐酸缓冲液中的最适...
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- 双质粒系统共表达大肠杆菌肉碱脱水酶基因caiB及其辅酶合成基因caiE被引量：8收藏
- 作者：范立强 袁勤生 吴祥甫
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;中国科学院上海生物化学研究所
- 来源：《生物化学与生物物理学报》 2002
- 关键词：肉碱 共表达 双质粒系统 相容质粒 不相容质粒 大肠杆菌 肉碱脱水碱 辅酶合成基因
- 摘要：caiB基因和caiE基因分别编码肉碱脱水酶及其辅因子合成酶 ,两者的共表达可以获得高活性肉碱脱水酶的重组菌。分别用两相容性质粒和不相容质粒共表达肉碱脱水酶及其辅酶合成基因 ,并对两种方法进行了比较。经IPTG诱导 ,相...
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- 人EC-SOD的克隆及高效表达被引量：7收藏
- 作者：范立强 贺华君 袁勤生 杨冠珍 吴祥甫
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所;中国科学院上海生物化学研究所
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2002
- 关键词：EC-SOD 大肠杆菌 昆虫杆状病毒 基因克隆 基因表达 人胞外超氧化物歧化酶
- 摘要：将编码人胞外超氧化物歧化酶 ( EC- SOD)成熟肽的 c DNA插入含 T7启动子的质粒p ET- 2 8a( + )中构建表达质粒 p ET- EC- SOD,表达菌株用 1 mmol/ L异丙基硫代 - β- D...
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- 虫草减轻自由基引起的细胞氧化损伤被引量：6收藏
- 作者：顾宇翔 宋聿文 范立强 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物反应器国家重点实验室
- 来源：《食品科学》 2008
- 关键词：抗氧化 冬虫夏草 蛹虫草 发酵 自由基 SMMC-7721
- 摘要：目的:考察天然冬虫夏草、蛹虫草及其发酵制品水提物和醇提物减轻自由基引起的人肝癌细胞株SMMC-7721氧化损伤的能力。方法:测定虫草5个抗氧化指标:减轻H2O2对细胞生长的毒害作用,抑制自由基诱导的脂质过氧化,抑制胞内G...
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- 不相容双质粒共表达大肠杆菌肉碱脱水酶基因caiB及其辅因子合成酶基因caiE被引量：6收藏
- 作者：范立强 袁勤生 吴祥甫
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;中国科学院上海细胞与生物化学研究所
- 来源：《中国医药工业杂志》 2002
- 关键词：肉碱 巴豆甜菜碱 脱水酶 不相容质粒 共表达 大肠杆菌
- 摘要：基因 cai B和基因 cai E分别编码肉碱脱水酶及其辅因子合成酶 ,携带这两个基因的重组菌可以共表达两个外源蛋白 ,得到高活性肉碱脱水酶。分别构建这两个基因的表达质粒 p ET2 8cai B和 p ET2 2 ca...
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- 突变的人铜、锌超氧化物歧化酶基因的克隆、测序及表达被引量：6收藏
- 作者：施惠娟 孙建新 范立强 魏东芝 吴祥甫 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所;中国科学院上海生物化学研究所
- 来源：《中国生化药物杂志》 1999
- 关键词：超氧化物歧化酶 PCR 基因突变 rhCu Zn-MSOD
- 摘要：目的：通过基因工程的方法将ｒｈＣｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ ｃＤＮＡ基因改造以得到更加稳定的酶。方法：以本实验室构建的 ｒｈＣｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ ｃＤＮＡ为模板，利用含有突变核苷酸的引物进行 ＰＣＲ扩增，将正确测定的含 ｒｈＣｕ， ...
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- 重组人Cu·Zn-SOD工程菌发酵工艺的研究被引量：4收藏
- 作者：陈长华 付水林 范立强 苏惠娟 魏东芝 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物工程学院
- 来源：《药物生物技术》 1999
- 关键词：SOD 发酵 重组 大肠杆菌 铜 锌
- 摘要：人Cu·Zn SOD是一种重要的氧自由基清除剂 ,传统工艺是从动物血中提取得到 ,受原料来源的限制。从人胎肝中提取了hCu·Zn SODcDNA构建了基因工程菌 ,同时对其表达产物的条件进行研究 ,着重探索了接种量、接种...
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- 人GPx1基因的克隆及其序列分析被引量：4收藏
- 作者：贺华君 范立强 袁勤生 谢倩 吴祥甫
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;中国科学院上海生物化学研究所
- 来源：《中国药学杂志》 2001
- 关键词：谷胱甘肽氧化物酶 基因克隆 序列分析 GPx家族 超氧化物歧化酶
- 摘要：目的 克隆中国人谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx1)的cDNA。方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR) ,以中国人胎盘组织总RNA为模板 ,扩增中国人谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx1)的cDNA ,进行序列分析。计算...
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- Identification and characterization of the minimal androgen-regulated kidney-specific kidney androgen-regulated protein gene promoter被引量：4收藏
- 作者：Liqiang Fan Dianne O Hardy James F Catteral Jian Zhao Suxia Li
- 机构：The State Key Laboratory of Bioreactor Engineering;Centre for Biomedical Research
- 来源：生物化学与生物物理学报（英文版） 2008
- 关键词：androgen receptor kidney proximal tubule cell promoter
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- 分子生物学全英文课程建设的探索与实践被引量：4收藏
- 作者：陈雨蒙 蔡孟浩 吴海珍 范立强 赵健 张惠展 范建华
- 机构：华东理工大学生物工程学院应用生物学系
- 来源：《中国生物化学与分子生物学报》 2024
- 关键词：全英文授课 分子生物学 课程建设 专业英语
- 摘要：“分子生物学”是普通高等院校生物类相关专业的核心课。随着“双一流”建设、一流本科建设等政策的推进,全英文课程建设面对机遇与挑战。华东理工大学2019年首次开设《分子生物学全英文》课程,对课程建设进行了改革和实践,包括形象...
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- 微生物转换法——DL-肉碱解旋的新思路被引量：4收藏
- 作者：范立强 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物化学研究所
- 来源：《中国药学杂志》 1999
- 关键词：大肠杆菌 DL-肉碱 肉碱 消旋体 微生物转换法
- 摘要：目的：利用微生物酶转化由ＤＬ－肉碱消旋体制备Ｌ－肉碱。方法：ＤＬ－肉碱脱水制得巴豆甜菜碱，经大肠杆菌转化形成Ｌ－肉碱。薄层定性、半定量分析肉碱及其它季铵盐，酶旋光定量测定Ｌ－肉碱。结果：改进对甲苯磺酸法制备巴豆甜菜碱，用...
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- 游离卡尼汀的酶法测定被引量：2收藏
- 作者：范立强 袁勤生
- 机构：华东理工大学生化工程系
- 来源：《中国医药工业杂志》 1998
- 关键词：卡尼汀 酶促反应 分光光度法 酶法测定
- 摘要：酶法测定游离卡尼汀的原理是通过卡尼汀乙酰转移酶的酶促反应，以及与５，５′－二硫代双（２－硝基苯甲酸）反应产生在４１２ｎｍ波长具强吸收的黄色产物。本法简便快速、精确，灵敏度与重现性均理想，便于推广。
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- 大肠杆菌转化巴豆甜菜碱合成L-卡尼汀被引量：2收藏
- 作者：范立强 袁勤生
- 机构：华东理工大学生化研究所
- 来源：《中国医药工业杂志》 1998
- 关键词：卡尼汀 巴豆甜菜碱 大肠杆菌 酶法 合成 肉毒碱
- 摘要：利用大肠杆菌的卡尼汀代谢途径，建立了以巴豆甜菜碱为底物、酶法制备Ｌ－卡尼汀的新方法。催化巴豆甜菜碱转化的酶是可诱导的胞内酶，既催化巴豆甜菜碱水合，又催化卡尼汀的脱水反应。厌氧培养、在培养基中加入Ｌ－卡尼汀或巴豆甜菜碱都有...
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- 凋亡素融合蛋白在HeLa细胞中的转导及体外活性分析被引量：1收藏
- 作者：华迪 赵健 范立强 王富军 汪雅雯
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;浙江日升昌药业有限公司
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2010
- 关键词：穿膜肽 EC-SOD HeLa细胞
- 摘要：研究胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)的肝素结合域(HBD)在HeLa细胞中的转导活性,并证实HBD具有运载药物蛋白(凋亡素)进入细胞并诱导肿瘤细胞凋亡的能力。通过克隆表达的HBD-EGFP融合蛋白经Ni2+-NTA纯化...
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- N-乙酰氨基葡萄糖对水稻的抗寒作用研究被引量：1收藏
- 作者：刘洋 张洋 范立强 赵梦瑶 赵黎明
- 机构：华东理工大学生物工程学院;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《南方农业学报》 2021
- 关键词：N-乙酰氨基葡萄糖 水稻 抗寒性 脱落酸途径
- 摘要：【目的】探究N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetyl-D-glucosamine,NAG)对水稻幼苗的抗寒效果及其潜在的抗寒机制,以期为NAG在农业免疫诱抗领域的应用提供理论依据。【方法】以水稻品种内5优907为供试材料,外...
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- 大肠杆菌肉碱脱水酶基因的克隆、测序及高效表达被引量：1收藏
- 作者：范立强 施惠娟 贺华君 袁勤生 杨冠珍 吴祥甫
- 机构：华东理工大学生物化学研究所;中国科学院上海生物化学研究所
- 来源：《中国生物制品学杂志》 2002
- 关键词：大肠杆菌 肉碱脱水酶 测序 高效表达 L-肉碱 基因克隆 表达
- 摘要：［摘 要］目的 克隆并表达大肠杆菌肉碱脱水酶基因。方法 用聚合酶链反应（PCR）从大肠杆菌K12s中扩增大肠杆菌肉碱脱水酶基因caiB，测定其DNA序列，将caiB基因重组到T7启动子控制下的表达载体pET－28a（＋）...
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- 雄激素可调节的肾脏近端肾小管上皮细胞靶向杂合启动子的优化被引量：1收藏
- 作者：孟军 刘飞 范立强 朱庆庆 吴宝杰 左丽君
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2014
- 关键词：肾脏 雄激素调节蛋白 杂合启动子 雄激素应答元件
- 摘要：为研究肾脏雄激素调节蛋白杂合启动子Kap147／HAGT-Kpn的细胞特异性，将HAGT-Kpn片段克隆到pGL3-Kap147载体质粒上，通过细胞转染和荧光素酶活性测定，证实Kap147／HAGT-Kpn杂合启动子只在...
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- 大肠杆菌caiE基因的克隆与高效表达被引量：1收藏
- 作者：范立强 袁勤生 吴祥甫
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所;中国科学院上海生物化学研究所
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2002
- 关键词：肉碱 表达载体 基因克隆 基因表达 大肠杆菌
- 摘要：用聚合酶链反应 ( PCR)从大肠杆菌 K1 2 s中扩增大肠杆菌肉碱代谢相关酶基因 cai E,将其克隆到克隆载体 p Bluescript SK中 ,测序表明 :该基因有 61 2 bp,与文献报道相比 ,有 1 0...
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- 重组人SOD2/3杂合酶的制备及其生物活性初探被引量：1收藏
- 作者：程安阳 范立强 赵健 李小灵 王刚
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2011
- 关键词：SOD2/3杂合酶 表达 纯化 抗肿瘤
- 摘要：为获得重组SOD2/3杂合酶,以及观察SOD2/3能否转导入宫颈癌细胞,抑制肿瘤细胞的增殖,构建了原核表达载体pET-SOD2/3,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达获得N端带有6个组氨酸标签的SOD2/3...
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- 重组黄杆菌肝素酶Ⅲ的纯化、表征及培养条件对酶生产的影响(英文)被引量：1收藏
- 作者：高兴 赵健 范立强 李素霞 王富军 姬胜利 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;浙江日升昌药业有限公司;山东大学药学院
- 来源：《生物工程学报》 2009
- 关键词：肝素酶Ⅲ 谷胱甘肽-S-转移酶 肝素黄杆菌 可溶性表达 表征
- 摘要：肝素酶III是一种特异性地裂解乙酰肝素的酶,在大肠杆菌中表达时容易形成包涵体。为实现肝素酶III的可溶性表达,利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)与肝素酶III融合性能,通过构建相应的表达质粒pGEX-heparinase...
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- 基于网络药理学探究EGCG干预MDA-MB-231细胞的潜在分子机制被引量：0收藏
- 作者：谢玲 益钧 宋永佳 李卓渝 范立强 赵黎明
- 机构：华东理工大学生物工程学院;三生国健药业(上海)股份有限公司研发中心
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2021
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG) 三阴性乳腺癌 网络药理学 分子对接 作用机理
- 摘要：基于网络药理学分析绿茶中的主要多酚物质表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin Gallate,EGCG)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的潜在作用靶点及其分子机理。使用数据库检索EGCG和MDA...
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- 结核分枝杆菌RipB基因的克隆、表达及对藤黄微球菌生长的影响被引量：0收藏
- 作者：王刚 范立强 程安阳 李小灵 潘忠孝 孟军
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2013
- 关键词：结核分枝杆菌 RipB基因 克隆表达 生物活性
- 摘要：提取肺结核分枝杆菌基因组DNA,PCR扩增RipB基因并将其连接到表达载体pET-21a上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,用IPTG诱导表达重组蛋白。SDSPAGE表明:重组RipB表达蛋白量约占菌...
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- Cyclobacterium qasimii脱乙酰酶的异源表达及酶学性质被引量：0收藏
- 作者：马佳菲 秦臻 范立强 赵黎明 蒋丽华
- 机构：华东理工大学生物工程学院/发酵工业分离提取技术研发中心/生物反应器工程国家重点实验室;上海大学生命科学学院
- 来源：《食品科学技术学报》 2020
- 关键词：Cyclobacterium qasimii 氨基葡萄糖 N-乙酰氨基葡萄糖 脱乙酰酶 异源表达 酶学性质
- 摘要：氨基葡萄糖因具有丰富的生物活性而被广泛应用,但目前其工业化生产均需利用浓酸在高温条件下进行脱乙酰反应;因此,需要寻找一种环境友好的生物催化法来取代酸水解法脱乙酰基。筛选并得到了来源于卡西氏菌Cyclobacterium ...
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- 酿酒酵母甲酸脱氢酶在大肠杆菌中的高效表达、纯化及其酶学性质被引量：0收藏
- 作者：倪敏君 范立强 王怡 张锐 赵健 李素霞
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《中国生物制品学杂志》 2011
- 关键词：酿酒酵母 甲酸脱氢酶类 NADH 克隆 分子 基因表达
- 摘要：目的克隆酿酒酵母甲酸脱氢酶(Formate dehydrogenase,FDH)基因,在大肠杆菌中表达、纯化重组蛋白,并进行酶学性质分析。方法以酿酒酵母基因组DNA为模板,采用温度梯度PCR法扩增fdh基因,重叠PCR技...
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- Combinatorial metabolic engineering of Escherichia coli for de novo production of structurally defined and homogeneous Amino oligosaccharides被引量：0收藏
- 作者：Jinqi Shi Chen Deng Chunyue Zhang Shu Quan Liqiang Fan Liming Zhao
- 机构：State Key Laboratory of Bioreactor Engineering;Organ Transplant Center;Shanghai Collaborative Innovation Center for Biomanufacturing Technology(SCICBT)
- 来源：合成和系统生物技术(英文) 2024
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