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酶法合成核苷类抗病毒药物被引量:25收藏 分享
作者:邱蔚然 丁庆豹
机构:华东理工大学生物工程学院
来源:《中国医药工业杂志》  1999
关键词:核苷磷酸化酶  抗病毒药  合成  酶法  
摘要:综述了近几年酶法合成核苷类抗病毒药物的研究进展,主要包括核苷磷酸化酶、N-脱氧核糖转移酶的应用,以及应用一些酶进行糖或碱基的修饰等方面。
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D-核糖产生菌的选育及发酵被引量:20收藏 分享
作者:高淑红 邱蔚然 丁庆豹 蔡华 孙强
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2000
关键词:D-核糖  枯草芽孢杆菌  诱变育种  发酵  
摘要:以枯草芽孢杆菌D-2 为出发菌株,经紫外诱变,得到一株莽草酸缺陷型突变株D-202,摇瓶发酵D-核糖产量可达到52.6g/L。该菌遗传稳定性良好。通过发酵条件的优化,最高产量可达65g/L。经2t发酵罐中试,发酵单位达到...
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用固定化啤酒酵母细胞合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱被引量:16收藏 分享
作者:牛红星 邱蔚然 丁庆豹
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2002
关键词:合成  胞嘧啶核苷二磷酸胆碱  卡拉胶  魔芋多糖  啤酒酵母  固定化细胞  CDP-胆碱  医药工业  
摘要:κ-卡拉胶 -魔芋多糖复配胶包埋的啤酒酵母细胞 ,经冻融处理后用于合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱 (CDP-胆碱 )。结果表明 :2 5 0 m L摇瓶中加入 5 0 m L反应液 (葡萄糖 40 0 mmol/ L,CMP1...
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应用乙酰短杆菌酶法合成2’-脱氧腺苷被引量:13收藏 分享
作者:洪云海 丁庆豹 欧伶 邱蔚然
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海秋之友生物科技有限公司
来源:《工业微生物》  2006
关键词:核苷磷酸化酶  乙酰短杆菌  2’-脱氧腺苷  酶法合成  
摘要:胸苷和腺嘌呤在乙酰短杆菌作用下转化成胸腺嘧啶和目标产物2’-脱氧腺苷。50mL的三角瓶装液10mL,40mmol/L的底物,50mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH7)进行反应,5%游离乙酰短杆菌在55℃下,经1h转化率就可...
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核苷磷酸化酶的产酶条件优化的研究被引量:13收藏 分享
作者:闫蓬勃 邱蔚然 丁庆豹
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《药物生物技术》  2001
关键词:乙酰短杆菌  核苷磷酸化酶  5-氟尿苷  产酶条件  
摘要:以鸟苷和 5 氟尿嘧啶为底物 ,乙酰短杆菌菌体为酶源酶法合成 5 氟尿苷。采用酵母浸膏培养基(酵母浸膏 4.0 % ,葡萄糖 0 .4% ,NaCl 0 .3 % ,pH7.0 ) ,较高的溶氧量 ,同时添加 0 ....
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麦芽根中5′-磷酸二酯酶的制备及性质被引量:11收藏 分享
作者:李德莹 邱蔚然 丁庆豹
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2002
关键词:制备  麦芽根  5′-磷酸二酯酶  5′-核苷酸  核糖核酸  热稳定性  pH稳定性  啤酒废料  
摘要:从麦芽根中提取 5′-磷酸二酯酶 ,酶活可达 474U/ m L。将所得酶液用于水解酵母核糖核酸 ,得到 5′-CMP、UMP、GMP、AMP 4种单核苷酸。最佳反应条件为 :底物 RNA浓度为0 .0 1 g/ m L...
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酶法合成抗病毒药物阿糖腺苷被引量:11收藏 分享
作者:郭勇莉 丁庆豹 欧伶 邱蔚然
机构:华东理工大学生物反应器工程重点实验室;上海秋之友生物科技有限公司
来源:《生物技术》  2006
关键词:产气肠杆菌  阿糖尿苷  阿糖腺苷  尿苷磷酸化酶  嘌呤核苷磷酸化酶  
摘要:目的:为了开发一种生产阿糖腺苷的有效方法。方法:研究了以产气肠杆菌完整细胞为催化剂酶法合成阿糖腺苷,优化了菌体培养条件以及酶反应条件。结果:在培养基中添加0.5%葡萄糖,33℃下培养16h,既能得到较多菌体,又能使菌体的...
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大肠杆菌核苷磷酸化酶的重组表达和活性被引量:11收藏 分享
作者:谭黎 欧阳立明 丁庆豹 欧伶
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2008
关键词:大肠杆菌  嘌呤核苷磷酸化酶  尿苷磷酸化酶  胸苷磷酸化酶  表达  
摘要:将大肠杆菌K-12菌株来源的嘌呤核苷磷酸化酶、尿苷磷酸化酶和胸苷磷酸化酶基因分别克隆到pET-11a载体并转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌表达,通过SDS-PAGE分析和酶的活性测定,重组菌诱导表达后目的蛋白的表达量...
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乙酰短杆菌酶法合成5-甲基尿苷被引量:6收藏 分享
作者:丁庆豹 邱蔚然
机构:华东理工大学生物工程学院
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  1999
关键词:酶法  合成  5-甲基尿苷  乙酰短杆菌  
摘要:用乙酰短杆菌完整细胞为酶源,以鸟苷和胸腺嘧啶为底物,酶法合成5-甲基尿苷。最佳反应条件为:底物浓度100~200mmol/L,pH8.0,磷酸盐缓冲液浓度10~50mmol/L,60°C,摇床转速120r/min,反应1...
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胞苷生产菌的选育被引量:6收藏 分享
作者:盛春雷 丁庆豹 丁翠敏 欧伶 邱蔚然
机构:华东理工大学生物反应器工程重点实验室;南通秋之友生物科技有限公司
来源:《生物技术》  2007
关键词:胞苷  枯草芽孢杆菌  菌种选育  发酵  
摘要:目的:筛选得到胞苷发酵单位较高的菌株,并对发酵过程作初步研究。方法:以胞苷脱氨酶缺失枯草芽孢杆菌DOS7为出发菌株,对其进行紫外诱变、5-氟胞苷(5FCR+)和2-杂氮尿嘧啶抗性(2AU+)抗性筛选。结果:通过紫外诱变和...
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酶法合成抗癌新药氟铁龙前体——5-FUR被引量:5收藏 分享
作者:闫蓬勃 丁庆豹 邱蔚然 严滢 石佳瑛
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2001
关键词:酶法合成  5-氟尿苷  乙酰短杆菌  5-氟尿嘧啶  鸟苷  抗癌药物  
摘要:筛选得到一株核苷磷酸化酶活力高的乙酰短杆菌 ,以该菌体为酶源酶法合成抗癌新药氟铁龙前体 5-氟尿苷 ,所用反应物为鸟苷和 5-氟尿嘧啶。在 1 50 m L的摇瓶装液 1 5m L的条件下进行研究 ,结果显示 :菌体添加...
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利用固定化啤酒酵母合成5’-核苷三磷酸被引量:4收藏 分享
作者:由洋 丁庆豹 欧伶 邱蔚然
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;南通秋之友生物科技有限公司
来源:《工业微生物》  2007
关键词:固定化啤酒酵母细胞  核苷一磷酸  核苷三磷酸  κ-卡拉胶-魔芋多糖复配胶  
摘要:固定化啤酒酵母细胞由5’-核苷一磷酸(NMPs)合成5’-核苷三磷酸(NTPs)。在250mL摇瓶中加入20g固定化酵母细胞和20mL反应液(NMP 40mmol/L,葡萄糖150mmol/L,K2HPO4-KH2PO4...
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D-核糖发酵过程中的pH控制及对产D-核糖关键酶的影响被引量:4收藏 分享
作者:杨兆娟 徐京宁 丁庆豹 欧伶 邱蔚然
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海秋之友生物科技有限公司
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2005
关键词:D-核糖  pH值调控  关键酶  葡萄糖酸  发酵  枯草芽孢杆菌  
摘要:在枯草芽孢杆菌突变株D-756发酵生产D-核糖过程中,采用葡萄糖和葡萄糖酸钙混合发酵,葡萄糖酸作为pH调节剂,能促进菌体的生长,显著地提高D-核糖的产量。经酶活测定,发现流加葡萄糖酸能提高单位发酵液中葡萄糖酸激酶的酶活。...
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Two-step Enzymatic Synthesis of Guanine Arabinoside被引量:3收藏 分享
作者:Wei Xiaokun Ding Qingbao Ou Lin Zhang Lu Wang Changlu
机构:E China Univ Sci & Technol;Tianjin Univ Sci & Technol;Shanghai Weiping Biosci & Biotechnol Co Ltd
来源:CHINESE JOURNAL OF CHEMICAL ENGINEERING  2008
关键词:guanine arabinoside   2,6-diaminopurine arabinoside   purine nucleoside phosphorylase   pyrimidine nucleoside phosphorylase   adenylate deaminase   Enterobacter aerogenes   Aspergillus oryzae  
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化学酶法合成抗病毒药物2’,3’-双脱氧腺苷被引量:3收藏 分享
作者:辛自豪 丁庆豹 欧伶 邱蔚然
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;南通秋之友生物科技有限公司
来源:《药物生物技术》  2007
关键词:2’,3'-双脱氧腺苷  胡萝卜软腐欧文氏杆菌  化学酶法  合成  抗病毒  
摘要:2’,3’-双脱氧腺苷(ddA)具有良好的抗病毒作用。以胸苷为起始原料,经由酰化、环化、开环、催化加氢生成2’,3’-双脱氧胸苷(ddT),然后ddT和腺嘌呤在胡萝卜软腐欧文氏杆菌的作用下转化成胸腺嘧啶和ddA。结果显示...
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联合β-半乳糖苷酶和L-阿拉伯糖异构酶酶法合成D-塔格糖的研究被引量:2收藏 分享
作者:张留权 王玥 丁庆豹 欧伶 许彦梅 张春艳 魏晓琨
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;天津科技大学生物工程学院;上海斯贝生物科技有限公司
来源:《工业微生物》  2012
关键词:大肠杆菌  L-阿拉伯糖异构酶  B-半乳糖苷酶  D-塔格糖  
摘要:将大肠杆菌K-12中的β-半乳糖苷酶基因lacZ和L-阿拉伯糖异构酶基因araA以串联方式克隆到载体pET-28a(+)上,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。通过SDS-PAGE分析发现,重组菌株能表达出大量可...
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大肠杆菌酸性磷酸酶基因克隆表达及应用被引量:2收藏 分享
作者:黄莹 丁庆豹 欧伶 魏晓琨 许彦梅 张春艳 王玥
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海斯贝生物科技有限公司
来源:《生物技术通报》  2012
关键词:大肠杆菌  酸性磷酸酶  IMP  
摘要:将大肠杆菌K-12的酸性磷酸酶(AphA)完整基因和去信号肽基因分别克隆到pET-28a(+)载体上,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。经诱导检测,重组菌均能表达出高活性的可溶性酶蛋白,去信号肽表达更稳定。对重组菌的...
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重组胸苷磷酸化酶在大肠杆菌中的表达和1-(2-脱氧-β-D-呋喃核糖基)-1,2,4-三唑-3-甲酰胺的生成被引量:2收藏 分享
作者:丁翠敏 丁庆豹 欧阳立明 欧伶 邱蔚然
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海秋之友生物科技有限公司
来源:《中国医药工业杂志》  2008
关键词:胸苷磷酸化酶  表达  1-(2-脱氧-β-D-呋喃核糖基)-1  2  4-三唑-3-甲酰胺  优化  
摘要:研究了大肠杆菌BL21(DE3)中重组胸苷磷酸化酶的最佳诱导表达条件及1-(2-脱氧-β-D-呋喃核糖基)-1,2,4-三唑-3-甲酰胺(1)的最佳生成条件。菌体培养3.5h时加入8mmol/L乳糖诱导6h后,胸苷磷酸化...
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Induction of Recombinant Uridine Phosphorylase and Its Application in Biosynthesis of Pyrimidine Nucleosides被引量:2收藏 分享
作者:Ding Qingbao Ou Ling We Dongzhi We Xiaokun Xu Yanmei Zhang Chunyan
机构:E China Univ Sci & Technol;Shanghai Pucheng Biosci & Biotechnol Co Ltd
来源:CHINESE JOURNAL OF CHEMICAL ENGINEERING  2011
关键词:5-fluorouridine   lactose   uridine phosphorylase   pyrimidine nucleoside   uridine   5-fluorouracil  
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酶法合成5-杂氮-2’-脱氧胞苷被引量:1收藏 分享
作者:王丽慧 丁庆豹 欧伶 许彦梅 张春燕 王玥
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海璞诚生物科技有限公司
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2011
关键词:N-脱氧核糖转移酶II  5-杂氮-2’-脱氧胞苷  合成  
摘要:将瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)中的N-脱氧核糖转移酶II的基因(ntd)克隆到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建原核表达系统,成功地得到一株大量表达N-脱氧核糖转移酶II的菌株PND。以...
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大肠杆菌腺苷脱氨酶基因的克隆表达被引量:1收藏 分享
作者:栾海涛 丁庆豹 欧伶 魏晓琨 许彦梅
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海璞诚生物科技有限公司
来源:《生物技术通报》  2010
关键词:大肠杆菌  腺苷脱氨酶  基因工程  
摘要:将大肠杆菌K12菌株来源的腺苷脱氨酶基因(add)克隆到载体pET-28a中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。通过IPTG诱导,SDS-PAGE检测和酶活性的测定发现,重组菌表达产生大量腺苷脱氨酶,活性达到...
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高产耐热3′-磷酸二酯酶菌种的选育及酶性质的研究被引量:1收藏 分享
作者:修俊鹏 丁庆豹 欧伶 邱蔚然
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海秋之友生物科技有限公司
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2006
关键词:3′-磷酸二酯酶  3′-核苷酸  粘红酵母  诱变育种  
摘要:以粘红酵母(Rhodotoru la g lutin is)Q 0402为出发菌株,经紫外诱变,得到一株粘红酵母QX 0402。5 L发酵罐的发酵液中3′-磷酸二酯酶酶活力可达250 U/mL,为文献报道过的最高酶活力的...
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大肠杆菌胸苷激酶基因的克隆表达与应用研究被引量:0收藏 分享
作者:张广宇 丁庆豹 欧伶
机构:华东理工大学生物工程学院
来源:《生物技术》  2013
关键词:胸苷  胸苷酸  胸苷激酶  
摘要:目的:构建含大肠杆菌胸苷激酶基因(tdk)的重组质粒,并对胸苷激酶性质进行研究。方法:通过PCR技术从大肠杆菌K-12中扩增出tdk基因,并克隆到表达载体pET-28a(+)上,转入大肠杆菌BL21(DE3)中构建重组菌...
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利用κ-卡拉胶-魔芋多糖复配胶固定化酵母生产三磷酸腺苷被引量:0收藏 分享
作者:唐学友 丁庆豹 邱蔚然
机构:华东理工大学生物反应器国家重点实验室
来源:《药物生物技术》  2000
关键词:固定化酵母  κ-卡拉胶-魔芋多糖复配胶  ATP  
摘要:利用κ 卡拉胶 魔芋多糖复配胶包埋的固定化啤酒酵母细胞 ,由腺苷 (AR)生产三磷酸腺苷 (ATP)。采用HPLC法分析固定化细胞反应过程核苷 (酸 )的变化以及用琼脂糖平板电泳法对其工艺条件进行了优化。固定化细胞反应 ...
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麦芽根中5′-磷酸二酯酶和5′-磷酸单酯酶的提取被引量:0收藏 分享
作者:张群 丁庆豹 欧伶 夏林根
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《生物技术通报》  2008
关键词:麦芽根  5′-磷酸二酯酶  5′-磷酸单酯酶  提取  检测  
摘要:建立一种高效快速的从麦芽根中提取5′-磷酸二酯酶和磷酸单酯酶的方法。通过将麦芽根粉碎后,取一定粒度的麦芽根加一定量的去离子水浸泡,过滤后得粗酶液。用紫外分光光度法测定5′-磷酸二酯酶和5′-磷酸单酯酶的酶活,研究粉碎粒度...
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