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Cloning and characterization of the ddsA gene encoding decaprenyl diphosphate synthase from Rhodobacter capsulatus B10被引量:31收藏 分享
作者:Liu, Xinyi Wu, Haizhen Ye, Jiang Yuan, Qinsheng Zhang, Huizhan
机构: State Key Laboratory of Bioreactor Engineering
来源:Canadian Journal of Microbiology  2006
关键词:Amino acids - Bacteria - Cloning - Enzymes - Gene expression - Polypeptides  
Effect of CaCl2 as activity stabilizer on purification of heparinase I from Flavobacterium heparinum被引量:29收藏 分享
作者:Ma, Xiaolai Wang, Zunsheng Li, Suxia Shen, Qiong Yuan, Qinsheng
机构: State Key Laboratory of Bioreactor Engineering; Department of Biology
来源:Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences  2006
关键词:Bacteria - Cell culture - Chromatography - pH effects - Precipitation (chemical) - Purification  
转人Cu,Zn-SOD基因马铃薯的研究被引量:24收藏 分享
作者:刘晓鹏 姜宁 田阼茂 吕胜安 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;中国南方马铃薯中心
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2003
关键词:SOD  hCu,Zn—SOD  农杆菌  基因克隆  
摘要:采用 RT-PCR技术从人肝总 RNA中分离扩增了 490 bp的人铜锌超氧化物歧化酶(h Cu,Zn-SOD)基因的 c DNA序列 ,进行了序列测定 ,结果和文献报道的一致 ;构建了 Ca Mv3 5 S启动子驱动 ...
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重组人锰超氧化物歧化酶工程菌高效表达培养工艺的研究被引量:21收藏 分享
作者:张艳红 廖晓全 范立强 袁勤生
机构:华东理工大学生物工程学院国家重点实验室
来源:《中国药学杂志》  2002
关键词:重组人锰超氧化物歧化酶  工程菌  培养工艺  rhMn-SOD  
摘要:目的 确定重组人锰超氧化物歧化酶 (rhMn SOD)工程菌高效表达的最适培养工艺条件。方法 通过摇瓶培养研究了包括接种量、诱导时机、Mn2 + 浓度、诱导后培养时间、发酵过程中 pH变化以及初始 pH值对发酵的影响。 ...
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Bt培养基配比及伴孢晶体纯化条件的优化被引量:18收藏 分享
作者:王善利 马景芝 袁勤生
机构:华东理工大学生物工程学院
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2006
关键词:苏云金芽孢杆菌  培养基优化  晶体  提纯  均匀设计  
摘要:苏云金芽孢杆菌〔B t(HD-1)〕发酵中培养基的配方影响发酵水平,还决定发酵产物杀虫毒力的效果。本实验在基础参数试验基础上,采用均匀设计法对B t发酵中培养基组分、杀虫晶体蛋白纯化条件进行优化,并直接采用发酵中伴孢晶体...
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嗜热芽孢杆菌β-半乳糖苷酶发酵条件研究被引量:17收藏 分享
作者:陈少欣 魏东芝 王筱兰 袁勤生 俞俊棠
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2000
关键词:嗜热芽孢杆菌  β-半乳糖苷酶  发酵  
摘要:以嗜热芽孢杆菌为菌种,研究发酵生产β-半乳糖苷酶的条件。应用均匀设计法优化发酵培养基组成,结果为(g/L):乳糖0.5、蛋白胨2.0、牛肉浸膏2.0、K2HPO4 0.01。在温度55℃、初始pH7.0、摇床转速200r...
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钝顶螺旋藻Fe-SOD的纯化及性质被引量:12收藏 分享
作者:夏文超 李素霞 范立强 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物工程学院
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2003
关键词:Fe-SOD  钝顶螺旋藻  铁型超氧化物歧化酶  纯化  平均比活  稳定性  金属酶  
摘要:从螺旋藻中分离纯化的Fe-SOD平均比活为4576U/mg,总活力回收率50%,纯度达电泳纯。SDS-PAGE测定纯化的Fe-SOD亚基相对分子质量为21ku,每分子亚基含0.7个Fe原子;在Tris-盐酸缓冲液中的最适...
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人铜锌超氧化物歧化酶cDNA的克隆、表达、发酵及纯化工艺研究被引量:12收藏 分享
作者:施惠娟 范立强 陈长华 吴祥甫 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所;中国科学院上海生物化学研究所
来源:《中国药学杂志》  1999
关键词:铜  锌  超氧化物歧化酶  CDNA  基因克隆  
摘要:目的:用基因工程的方法获得人铜锌超氧化物歧化酶(hCu,Zn-SOD)的高产菌,通过发酵培养,最后纯化获得大量廉价的高纯度的hCu,Zn-SOD。方法:用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增了人铜锌超氧化物歧化酶(...
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重组人铜锌SOD在脱水过程中的二级结构变化及保护剂的作用被引量:10收藏 分享
作者:葛宇 刘玲 高剑英 高俊杰 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物工程学院;华东理工大学化学系
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2003
关键词:傅立叶红外光谱  蛋白质  重组人铜锌S0D  二级结构  保护剂  脱水过程  α—螺旋结构  
摘要:用衰减全反射(ATR)傅立叶变换红外光谱技术研究了重组人铜锌SOD(rhCu,Zn-SOD)在脱水过程中的二级结构变化及保护剂的作用。结果显示,在脱水过程中,蛋白质结构发生了重排,无论是真空干燥还是冷冻干燥,子峰峰位都发...
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重组羧肽酶B在胰岛素原C肽制备工艺中的应用被引量:9收藏 分享
作者:李素霞 田丽萍 张晓彦 夏文超 龚毅 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;中国科学院上海生命科学研究院生物工程中心
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2004
关键词:羧肽酶原B  羧肽酶B  融合表达  分离纯化  胰岛素原C肽  
摘要:用RT-PCR方法克隆了大鼠羧肽酶原B的cDNA编码序列,将其重组到原核表达质粒pT7-473中,并在大肠杆菌中以包涵体方式获得高表达。SDS-PAGE电泳及灰度扫描显示表达量达菌体总蛋白的35%,表达产物融合了表达质粒...
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SOD口腔膜剂的研制及对口腔粘膜溃疡的治疗作用被引量:9收藏 分享
作者:朱希强 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2005
关键词:Cu,Zn—SOD  EC—SOD  膜剂  口腔粘膜溃疡  
摘要:考察超氧化物歧化酶(SOD)口腔贴膜制备过程中温度和保温时间对SOD活性的影响及不同厚度药膜药物释放度的差异测定药膜中SOD的活性及其回收率、体外溶出、皮肤刺激性及药膜中SOD稳定性;并进行药膜重量差异检查和卫生学检查;...
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人EC-SOD的克隆及高效表达被引量:7收藏 分享
作者:范立强 贺华君 袁勤生 杨冠珍 吴祥甫
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所;中国科学院上海生物化学研究所
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2002
关键词:EC-SOD  大肠杆菌  昆虫杆状病毒  基因克隆  基因表达  人胞外超氧化物歧化酶  
摘要:将编码人胞外超氧化物歧化酶 ( EC- SOD)成熟肽的 c DNA插入含 T7启动子的质粒p ET- 2 8a( + )中构建表达质粒 p ET- EC- SOD,表达菌株用 1 mmol/ L异丙基硫代 - β- D...
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肝素黄杆菌发酵产肝素酶的工艺优化被引量:7收藏 分享
作者:马小来 伍炀 顾含真 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2005
关键词:肝素酶  肝素黄杆菌  发酵  
摘要:以肝素黄杆菌为研究对象,提出了一种将发酵分为生长和产酶两个阶段的生产肝素酶的新工艺。对培养基组成进行了优化,优化后组成(g/L)葡萄糖8,氯化铵4,磷酸二氢盐6,组氨酸0.75,甲硫氨酸0.75,氯化镁0.5;微量盐10...
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口服猪脾来源免疫抑制组分对小鼠免疫功能的影响被引量:7收藏 分享
作者:王凤山 袁勤生 程艳娜
机构:山东医科大学药学院;华东理工大学生物工程学院
来源:《中国药学杂志》  2000
关键词:猪  脾  免疫抑制  细胞免疫  体液免疫  POSISC-P  
摘要:目的 :研究口服Mr小于 5 0 0 0的猪 (SusscrofadomesticaBrisson)脾来源免疫抑制组分 (SISC p)的有效性。 方法 :通过给小鼠igSISC p ,实验其对小鼠巨噬细胞吞噬功能、迟发...
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PLGA微球中蛋白质和聚合物的相互作用被引量:7收藏 分享
作者:刘玲 葛宇 高剑英 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;南京医科大学公共卫生学院;华东理工大学化学系
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2003
关键词:重组人铜锌超氧化物歧化酶  乳酸—羟乙酸共聚物(PLGA)  药物微球  蛋白质分布  傅里叶红外光谱(FTIR)  
摘要:以复乳法制备 rh Cu,Zn-SOD的乳酸羟乙酸共聚物 (PLGA)微球 ,载药过程中观察到乳状液的聚集、包陷 ,使载体和药物共包埋形成药物微球。 DSC和 FTIR结果显示 ,大部分 rh Cu,Zn-SOD包埋入了...
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鲨鱼肝蛋白粗提物对大鼠肝线粒体抗氧化功能的影响被引量:6收藏 分享
作者:范秋领 黄才国 金艳 缪辉南 焦炳华 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2005
关键词:鲨鱼肝蛋白粗提物  硫代乙酰胺  急性肝损伤  线粒体  呼吸功能  抗氧化  
摘要:以400 m g/kg 2次腹腔注射硫代乙酰胺(TAA)建立大鼠急性肝损伤模型,并在注射TAA前1 h以80 m g/kg 2次腹腔注射鲨鱼肝蛋白粗提物进行预防,研究了鲨鱼肝蛋白粗提物对大鼠肝线粒体抗氧化功能的影响。注射...
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诱导剂对重组人锰超氧化物歧化酶表达的影响被引量:5收藏 分享
作者:张艳红 廖晓全 王逢 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2002
关键词:重组人锰超氧化物歧化酶  诱导剂  外源蛋白  基因表达  酶活力  诱导浓度  乳糖  巯基乙醇  
摘要:用异丙基 -β-D-硫代半乳糖苷 (IPTG)、乳糖、巯基乙醇对重组人锰超氧化物歧化酶(rh Mn-SOD)工程菌进行诱导 ,结果表明 3种物质都可以诱导 rh Mn-SOD外源蛋白的表述。通过酶活力、比活测定及电泳的结...
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诱导条件对重组人锰超氧化物歧化酶发酵的影响被引量:4收藏 分享
作者:陈车生 吴乾一 袁勤生 吴梧桐
机构:中国药科大学生命科学与技术学院;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2008
关键词:重组人锰超氧化物歧化酶  诱导  发酵  大肠杆菌  乳糖  
摘要:分别研究了3种诱导剂和Mn2+浓度对重组人锰超氧化物歧化酶(rhMn-SOD)发酵表达的影响,并进一步优化了乳糖诱导rhMn-SOD表达的条件。结果表明:异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)和乳糖诱导能够获得类似的表...
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高密度培养大肠杆菌TB1/pMAL-hOCIFm的优化条件被引量:4收藏 分享
作者:张兴群 王梁华 焦炳华 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;第二军医大学基础医学部生化与分子生物学教研室
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2005
关键词:破骨细胞形成抑制因子(OCIF)  表达  高密度培养  发酵  补料-分批培养  
摘要:利用Bioengeering3.7L自控式发酵罐,以分批培养和补料分批培养相结合的培养技术,高密度培养重组大肠杆菌TB1/pMAL-hOCIFm,生产重组人破骨细胞形成抑制因子成熟肽(recombinanthumanos...
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口服猪脾来源免疫抑制组分抗炎作用的实验研究被引量:2收藏 分享
作者:王凤山 袁勤生 程艳娜
机构:华东理工大学生物工程学院;山东大学药学院
来源:《中国药学杂志》  2001
关键词:猪  脾  免疫抑制组分  抗炎作用  
摘要:目的 研究口服Mr小于 5 0 0 0的猪脾来源免疫抑制组分 (SISC p)的抗炎作用。方法 通过给动物igSISC p ,观察其对巴豆油致小鼠耳廓肿胀和对大鼠棉球肉芽肿的影响。结果 igSISC p一次给药对巴豆油致...
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大肠杆菌caiE基因的克隆与高效表达被引量:1收藏 分享
作者:范立强 袁勤生 吴祥甫
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所;中国科学院上海生物化学研究所
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2002
关键词:肉碱  表达载体  基因克隆  基因表达  大肠杆菌  
摘要:用聚合酶链反应 ( PCR)从大肠杆菌 K1 2 s中扩增大肠杆菌肉碱代谢相关酶基因 cai E,将其克隆到克隆载体 p Bluescript SK中 ,测序表明 :该基因有 61 2 bp,与文献报道相比 ,有 1 0...
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乳酸-羟乙酸共聚物微球中rhCu,Zn-SOD稳定性研究被引量:1收藏 分享
作者:刘玲 葛宇 高俊杰 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;南京医科大学公共卫生学院
来源:《中国药学杂志》  2003
关键词:rhCu  Zn-SOD  乳酸-羟乙酸共聚物  药物微球  体外释放  蛋白质稳定性  
摘要:目的 以rhCu ,Zn SOD为模型蛋白 ,包裹入可生物降解聚合物PLGA内制备微球缓释制剂 ,详细研究制备过程中各因素以及体外释放对Cu ,Zn SOD活力和结构完整性的影响。方法 连苯三酚自氧化法测定酶活性 ,凝胶...
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血清胸腺因子(FTS)的合成和活性测定被引量:1收藏 分享
作者:廖晓全 周立娜 赵宗阁 徐康森 袁勤生
机构:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;中国医科大学基础医学院;中国药品生物制品检定所
来源:《华东理工大学学报(自然科学版)》  2005
关键词:血清胸腺因子  合成  胸腺切除  
摘要:采用芴甲氧羰基(Fm oc)固相肽合成法(Fm oc-SPPS)合成了血清胸腺因子(FTS),用中压液相阴离子柱一步纯化,经HPLC分析纯度,通过质谱和氨基酸序列测定鉴定合成产物。根据FTS恢复胸腺切除小鼠的脾细胞对免疫...
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Purification and partial characterization of recombinant Cu, Zn containing superoxide dismutase of Cordyceps militaris in E. coli被引量:0收藏 分享
作者:Wang, Zunsheng He, Zhuojing Shen, Qiong Gu, Yuxiang Li, Suxia Yuan, Qinsheng
机构: State Key Laboratory of Bioreactor Engineering; Department of Biology
来源:Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences  2005
关键词:Amino acids - Characterization - Copper oxides - DNA - Escherichia coli - pH - Purification - Zinc oxide  
超滤法纯化超氧物岐化酶被引量:0收藏 分享
作者:赵铭 袁勤生 朱树新
机构:华东化工学院生化工程研究所
来源:《华东化工学院学报》  1991
关键词:歧化酶  提纯  过滤膜  
摘要:研制了适合纯化猪血超氧物岐化酶(Cu.Zn-SOD)溶液的醋酸纤维素(CA)超滤膜,其截留分子量约为16 000。研究了溶液浓度、操作压力等因素对通量的影响。结果表明,自制CA膜超滤纯化SOD溶液性能优于一些市售膜。收率...
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