成果/Result
- 大肠杆菌乙酸代谢突变株的选育和特性研究被引量：15收藏
- 作者：李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《微生物学报》 2001
- 关键词：大肠杆菌 诱变选育 连续培养 乙酸 代谢突变株
- 摘要：在大肠杆菌高密度培养中 ,因代谢副产物乙酸积累 ,导致抑制菌体的生长和产物表达的下降。为减小乙酸的抑制作用 ,采用60 Co诱变处理大肠杆菌JM1 0 1 ,结合连续培养 (含乙酸钠选择压力 )定向富集方法 ,选育到一株...
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- 烷烃降解菌的筛选、鉴定及优势菌株的降解特性被引量：14收藏
- 作者：郭娜 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《应用与环境生物学报》 2011
- 关键词：烷烃降解 红球菌 菌株筛选 16S rDNA 石油污染土壤 生物修复
- 摘要：以正庚烷为唯一碳源,从长期受到石油污染的土壤中筛选获得可利用正庚烷的微生物14株.通过形态观察和16S rDNA序列比对,鉴定G2、G9、G14为红球菌属,G3、G27为人苍白杆菌属,G4、G7为芽孢杆菌属,G5、G10...
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- 重组大肠杆菌BL21(pBAI)生产人干扰素α2b被引量：10收藏
- 作者：朱筠 李志敏 张倩 甘人宝 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2008
- 关键词：大肠杆菌 人干扰素α2b PL启动子 培养
- 摘要：通过培养重组大肠杆菌BL21(pBAI)表达人干扰素α2b(Human Interferonα2b,hIFNα2b)。hIFNα2b表达由PL启动子控制,通过升温至42°C诱导表达。本研究比较了分批培养和多种补料分批培养...
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- 大肠杆菌乙酸代谢突变株的培养和外源基因表达被引量：9收藏
- 作者：李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2002
- 关键词：大肠杆菌 连续培养 乙酸耐受性 β-半乳糖苷酶
- 摘要：大肠杆菌 JL3是 JM1 0 1经诱变和连续培养所选育到的乙酸耐受性突变株。 JL3在复合培养基中产生的乙酸比 JM1 0 1少 ,菌体对葡萄糖的得率 ( YX/ S)增加。在基本培养基 M中连续培养 ,最大菌体得率 ...
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- 大肠杆菌DH5α及其耐乙酸突变株DA19在氮源限制下的代谢和关键酶特性研究被引量：7收藏
- 作者：张晓云 张艳军 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物工程学报》 2007
- 关键词：大肠杆菌 连续培养 乙酸 酶活
- 摘要：在氮源限制的基本培养基中对大肠杆菌DH5α及其耐乙酸突变株DA19进行连续培养,通过测定中心代谢途径关键酶的活性分析二者代谢差异。结果表明,DA19的6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)和异柠檬酸脱氢酶(ICDH)活性高于...
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- 重组肺炎克雷伯菌发酵联产3-羟基丙酸和1,3-丙二醇被引量：6收藏
- 作者：李清 黄艳娜 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《过程工程学报》 2014
- 关键词：肺炎克雷伯氏菌 3 羟基丙酸 1,3 丙二醇 辅因子再生 发酵 优化
- 摘要：对表达了高效醛脱氢酶的重组肺炎克雷伯氏菌以甘油为底物生产3．羟基丙酸和1，3-丙二醇的过程进行优化，将发酵过程中补料阶段甘油浓度分别控制为0-10，10-20，20-30g／L，并分3次间歇性补加甘油．结果表明，发酵过程...
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- 大肠杆菌及其耐乙酸突变菌的连续培养和代谢流比较被引量：6收藏
- 作者：张艳军 张晓云 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《化工学报》 2008
- 关键词：大肠杆菌 乙酸 代谢流 酶活
- 摘要：在氮源限制基本培养基中连续培养大肠杆菌DH5α及其乙酸耐受突变株DA19。与DH5α相比,突变株DA19降低了葡萄糖的消耗,减少了乙酸和丙酮酸的生成,提高了菌体关于葡萄糖的得率。利用物料平衡和代谢反应的化学计量关系,分析...
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- 异羟肟酸比色法测定D-核糖发酵液中葡萄糖酸的含量被引量：5收藏
- 作者：张宗玉 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《食品与发酵工业》 2005
- 关键词：葡萄糖酸 异羟肟酸比色法 葡萄糖 比色法测定 异羟肟酸 D-核糖 糖酸含量 发酵液 葡萄糖浓度 测定影响 检测结果
- 摘要：对异羟肟酸比色法测定葡萄糖酸含量的方法进行了改进。通过考察不同葡萄糖浓度对异羟肟酸比色法测定葡萄糖酸的影响,得出葡萄糖浓度对葡萄糖酸测定影响的干扰方程,据此计算得到的葡萄糖酸量可以排除葡萄糖的影响,使得检测结果更为准确。...
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- 基于能量循环再生系统酶法生产谷胱甘肽被引量：5收藏
- 作者：张星 崔向伟 李宗霖 李志敏
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2020
- 关键词：谷胱甘肽 谷胱甘肽双功能合成酶 多聚磷酸激酶 ATP再生
- 摘要：以多聚磷酸(polyP)为能量供体,通过构建双酶级联反应,以及偶联多聚磷酸激酶(PPK)和谷胱甘肽双功能合成酶(GshF),酶法合成了谷胱甘肽(GSH)。对GshF和PPK诱导表达条件进行了优化,表明低温18℃有利于蛋白...
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- 重组大肠杆菌多基因串联表达合成反式-4-羟基-L-脯氨酸被引量：5收藏
- 作者：盛花开 衣玉兰 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物技术》 2016
- 关键词：重组大肠杆菌 重叠PCR 无缝组装 反式-4-羟基-L-脯氨酸
- 摘要：[目的]得到表达多个基因的重组大肠杆菌,以期实现葡萄糖为碳源生产反式-4-羟基-L-脯氨酸。[方法]以菌液为模板,PCR得到不同来源的proB、proA、proC、p4h基因,重叠PCR串联相邻基因,所得片段通过无缝组装...
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- 大肠杆菌半胱氨酸合成途径强化对谷胱甘肽生物合成的影响被引量：3收藏
- 作者：万俊仙 张静 吴辉 李志敏
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2017
- 关键词：谷胱甘肽 半胱氨酸 基因串联表达 摇瓶发酵
- 摘要：谷胱甘肽(Glutathione,GSH)是一种细胞中广泛存在的活性巯基短肽,因其具有重要的生理活性功能而得到广泛关注。通过在Escherichia coli MG1655中过表达3-磷酸甘油酸脱氢酶(PGDH)和丝氨酸...
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- 重组大肠杆菌发酵生产谷胱甘肽的氨基酸添加策略优化被引量：3收藏
- 作者：王德正 吴辉 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物技术通报》 2015
- 关键词：谷胱甘肽 氨基酸 半胱氨酸 重组大肠杆菌
- 摘要：对表达双功能谷胱甘肽合成酶的重组大肠杆菌发酵生产谷胱甘肽(Glutathione,GSH)进行氨基酸添加策略优化,结果表明:基本培养基中未添加氨基酸时GSH产量为0.81 g/L;诱导2 h后添加17 mmol/L半胱氨...
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- 果糖和麦芽糖作为有氧碳源对大肠杆菌NZN111两阶段发酵中厌氧发酵的影响被引量：3收藏
- 作者：吴辉 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物工程学报》 2011
- 关键词：大肠杆菌NZN111 两阶段发酵 代谢调控 分解阻遏效应 有机酸
- 摘要：为了了解磷酸转移酶转运系统(PTS)依赖和非PTS依赖代谢的糖类对大肠杆菌生产琥珀酸的影响,进行了两阶段培养,有氧阶段采用PTS依赖型的果糖或非PTS依赖型的麦芽糖作为丙酮酸甲酸裂解酶(PFL)和乳酸脱氢酶(LDH)双突...
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- 腺嘌呤对大肠杆菌DH5α及其耐乙酸突变株DA19生长和代谢的影响被引量：3收藏
- 作者：张晓云 张艳军 李志敏 夏月兰 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《微生物学报》 2007
- 关键词：大肠杆菌(Escherichia coli) 腺嘌呤 乙酸 双向电泳
- 摘要：大肠杆菌DH5α和DA19在碳源限制的基本培养基中进行分批培养和氮源限制的基本培养基中进行连续培养,发现添加腺嘌呤会使DH5α生长改善,乙酸产生减少;对DA19的生长和代谢影响不明显。连续培养细胞的蛋白质组分析结果显示:...
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- 大肠杆菌利用木糖发酵产琥珀酸的研究被引量：2收藏
- 作者：唐绪位 李运杰 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物技术》 2014
- 关键词：琥珀酸 木糖 基因敲除
- 摘要：目的:研究大肠杆菌以木糖为碳源发酵产琥珀酸。方法:首先比较了实验室保藏的7种野生型大肠杆菌利用木糖发酵产琥珀酸的产量和得率,结果:表明野生型菌株琥珀酸对木糖的得率集中在0.34g/g^0.53g/g之间,得率较低,副产物...
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- 有机酸对肺炎克雷伯杆菌厌氧代谢甘油的影响被引量：2收藏
- 作者：薛学东 李伟 李志敏 周利 夏月兰 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《高校化学工程学报》 2011
- 关键词：有机酸 肺炎克雷伯杆菌 厌氧发酵 甘油
- 摘要：在肺炎克雷伯杆菌厌氧发酵甘油生产1,3-丙二醇的过程中,大量的副产物,特别是乳酸和乙醇等副产物的生成,导致1,3-丙二醇的浓度和得率下降。为了进一步了解有机酸加入后菌体的代谢情况,在菌体生长期同时加入柠檬酸、琥珀酸和延胡...
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- 葡萄糖供应速率对大肠杆菌表达及分泌人表皮生长因子的影响被引量：2收藏
- 作者：张海毅 李志敏 钱悦 张倩 甘人宝 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2006
- 关键词：人表皮生长因子 PL启动子 分泌 大肠杆菌
- 摘要：采用一株大肠杆菌BL 21(DE 3)[pBLMVL 2EGF]生产人表皮生长因子(hEGF),其中hEGF表达由PL启动子控制并通过phoA信号肽分泌到胞外。实验结果表明:诱导阶段以恒定比供应速率流加葡萄糖时,流加速率...
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- 基因atpA、purHD和ndh的过量表达对大肠杆菌DH5α生长的影响被引量：2收藏
- 作者：张艳军 张晓云 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《微生物学报》 2008
- 关键词：大肠杆菌 表达 atpA purH ndh
- 摘要：【目的】理解大肠杆菌DH5α及其耐乙酸突变株DA19在基本培养基中生长和乙酸积累差异的机理。【方法】根据前期针对两个菌株蛋白质组和培养中物料及能量平衡的分析,通过PCR分别扩增大肠杆菌DH5α及DA19的atpIBEFH...
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- 大肠杆菌DH5α及其耐乙酸突变株DA19在碳源限制培养基中乙酸的积累被引量：2收藏
- 作者：张晓云 张艳军 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2007
- 关键词：大肠杆菌 突变株 培养基 乙酸 耐受性
- 摘要：在碳源限制的基本培养基和复合培养基中分别对大肠杆菌DH5α及其耐乙酸突变株DA19进行分批培养,两者在复合培养基中的乙酸产量均明显高于基本培养基,相同培养基中DH5α的乙酸产量高于DA19。基本培养基中分批培养的物料衡算...
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- 甲醇流加策略对重组毕赤酵母表达人肝再生增强因子的影响被引量：2收藏
- 作者：平续斌 李志敏 叶勤 黄秀东 曹之舫
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海万兴生物制药有限公司
- 来源：《中国医药工业杂志》 2008
- 关键词：毕赤酵母 人肝再生增强因子 甲醇流加策略 高密度发酵
- 摘要：考察了5L发酵罐中三种甲醇流加策略(恒溶氧、恒比生长速率和恒甲醇浓度)对重组毕赤酵母表达人肝再生增强因子(hALR)的影响。控制恒定甲醇浓度为10g/L诱导时,甲醇比消耗速率和hALR表达速率显著高于其它两种流加策略,最...
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- 弱化呼吸链水平对代谢工程大肠杆菌聚羟基丁酸乳酸酯合成的影响被引量：2收藏
- 作者：陆静娴 李志敏 叶勤 吴辉
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物工程学报》 2019
- 关键词：聚3-羟基丁酸乳酸酯 大肠杆菌 代谢工程 乳酸组分 呼吸链弱化 Q8 聚羟基脂肪酸酯(PHA)
- 摘要：聚3-羟基丁酸乳酸酯[Poly(3-hydroxybutyrate-co-lactate), P(3HB-co-LA)],属于聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHA)家族的一员,是一种具有良好...
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- 酶法生产L-半胱氨酸产酶培养基的研究被引量：1收藏
- 作者：范翠丽 李志敏 叶勤
- 机构：上海市华东理工大学生物工程学院国家重点实验室
- 来源：《生物技术》 2014
- 关键词：DL-2-氨基-△2-噻唑啉-4-羧酸 葡萄糖 L-半胱氨酸合成酶 诱导
- 摘要：目的:找到能够高效合成L-半胱氨酸合成酶的培养基。方法:研究进行了假单胞菌F12在复合培养基和简单培养基合成L-半胱氨酸能力的对比及产酶过程分析。结果:简单培养基生长的菌体合成L-半胱氨酸能力较高,单位菌体产生L-半胱氨...
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- CydDC蛋白的表达及对谷胱甘肽运输的影响被引量：1收藏
- 作者：全聪 张静 吴辉 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物技术通报》 2016
- 关键词：谷胱甘肽 运输蛋白 共表达 重组大肠杆菌
- 摘要：在重组大肠杆菌中共表达了谷胱甘肽运输蛋白CydDC与双功能合成酶GshF,通过增强对谷胱甘肽的运输作用,提高谷胱甘肽产量。实验结果表明,目的蛋白CydDC及GshF均成功表达;重组菌MG1655(pTrc99a-as/p...
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- 谷胱甘肽双功能合成酶固定化研究被引量：1收藏
- 作者：王爱琪 张星 吴辉 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2019
- 关键词：谷胱甘肽 谷胱甘肽双功能合成酶 氧化石墨烯 固定化
- 摘要：对谷胱甘肽双功能合成酶(GshF)固定化载体进行了筛选,最终选择氧化石墨烯(GO)作为GshF的固定化载体,并对其固定化条件和固定化酶学性质进行了探讨。结果表明,固定化体系最优pH为8.0,温度为4℃,固定化时间为30 ...
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- 基本培养基中芳香族氨基酸和维生素对D-核糖生产的影响被引量：1收藏
- 作者：吴琳 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2009
- 关键词：枯草芽孢杆菌 D-核糖 烟酸 吡哆醛
- 摘要：考察了芳香族氨基酸和维生素对转酮醇酶缺失的枯草芽孢杆菌生长以及D-核糖生产的影响。实验结果表明:L-酪氨酸、L-色氨酸、L-苯丙氨酸、生物素、烟酸、吡哆醛的添加能改善菌体生长,提高D-核糖产量,特别是烟酸作用尤其明显。在...
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- 固定化诺卡氏菌批次连续转化生产L(+)酒石酸被引量：1收藏
- 作者：黄磊 龙琼英 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2007
- 关键词：L(+)酒石酸 诺卡氏菌 环氧琥珀酸水解酶 固定化细胞
- 摘要：采用卡拉胶包埋具有环氧琥珀酸水解酶活性的诺卡氏菌用于生产L(+)酒石酸。为了提高细胞固定化的效率,采用自制的固定化装置,将固定化细胞制成细条状,可以加快固定化细胞的制备,获得具有高活性和强度的固定化细胞颗粒,固定化细胞的...
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- 小分子代谢物对黑曲霉己糖激酶和丙酮酸激酶的酶活调控被引量：1收藏
- 作者：孟晓建 于建东 郑小梅 郑平 李志敏 孙际宾 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;中国科学院系统微生物工程重点实验室;中国科学院天津工业生物技术研究所;国家合成生物技术创新中心
- 来源：《生物技术通报》 2021
- 关键词：黑曲霉 柠檬酸 己糖激酶 丙酮酸激酶 代谢调控
- 摘要：黑曲霉是柠檬酸的工业生产菌株,糖酵解中的3个不可逆反应是柠檬酸积累的重要调控节点,但己糖激酶和丙酮酸激酶的代谢调控研究相对较少,本研究旨在加深对己糖激酶和丙酮酸激酶代谢调控的认识。首先,将黑曲霉己糖激酶和丙酮酸激酶进行内...
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- 红球菌Rhodococcus.sp G14生物转化合成2-苯基丙酸被引量：1收藏
- 作者：左可 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物技术通报》 2013
- 关键词：生物催化 异丙苯 2-苯基丙酸 优化
- 摘要：2-苯基丙酸作为布洛芬合成过程中的一种重要的医药中间体,目前对其的生产及应用正在逐年增加,但价格十分昂贵。对野生红球菌Rhodococcussp.G14生物催化异丙苯合成2-苯基丙酸的条件进行探索。利用响应面优化方法,得...
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- 丙酰辅酶A的体外酶法合成被引量：0收藏
- 作者：聂雪彤 吴辉 李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器国家重点实验室
- 来源：《北京化工大学学报（自然科学版）》 2016
- 关键词：大肠杆菌 丙酰-CoA 琥珀酸 高效液相色谱(HPLC)
- 摘要：丙酰辅酶A(丙酰-CoA)是一种重要的代谢中间物,可以用来生产丙烯酸、3-羟基丙酸、β-羟基戊酸和聚酮化合物。将天然的琥珀酰辅酶A合成酶、甲基丙二酰辅酶A变位酶、甲基丙二酰辅酶A脱羧酶在大肠杆菌中克隆并过表达,采用这3种...
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- 大肠杆菌乙酸耐受株的代谢流分布被引量：0收藏
- 作者：李志敏 叶勤
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2002
- 关键词：大肠杆菌 乙酸耐受株 代谢流分布
- 摘要：通过在基本培养基中的连续培养 ,比较了大肠杆菌耐乙酸突变株 JL3碳源基本代谢流量分布与出发株 JM1 0 1的差异 ,发现随比生长速率的增大 ,两者进入磷酸戊糖途径的碳流增加 ,进入三羧循环的碳流减少。在相同的比生长速...
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