成果/Result
- 温度对重组大肠杆菌生长及外源蛋白表达的影响被引量：85收藏
- 作者：叶姣 陈长华 夏杰 付水林 杨雅琴
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2002
- 关键词：外源蛋白 重组大肠杆菌 超氧化物歧化酶 诱导温度 发酵生产 基因重组 基因表达 酶活性
- 摘要：对重组大肠杆菌 (E.coli) BL2 1 (DE3 )发酵生产 rh Cu/ Zn-SOD的诱导温度进行了优化 ,考察了 3 7°C和 3 0°C下重组菌的生长规律及产物表达。在 5 L自控发酵罐中的发酵结果表明 :...
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- 高效液相色谱法测定螺旋霉素发酵液中的有机酸被引量：83收藏
- 作者：李友元 陈长华 陶萍
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海交通大学分析测试中心
- 来源：《色谱》 2002
- 关键词：高效液相色谱法 测定 螺旋霉素 发酵液 抗生素
- 摘要：采用高效液相色谱法在Zorbax 30 0 SBC18色谱柱 (5 μm ,4 6mmi.d .× 15cm)上以 0 0 1mol/L磷酸缓冲液(pH 2 32 )和甲醇的二元流动相梯度分离测定了螺旋霉素发酵液...
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- 响应面设计法优化腺苷发酵培养基被引量：75收藏
- 作者：江元翔 高淑红 陈长华
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2005
- 关键词：响应面设计法 枯草杆菌 腺苷 发酵
- 摘要：利用响应面方法对枯草芽孢杆菌生产腺苷的培养基进行了优化。首先用两水平因子实验对培养基组分酵母粉、玉米浆、KH2PO4、MgSO4、(NH4)2SO4对产苷的影响进行评价,结果表明:主要影响因子为酵母粉、KH2PO4和(N...
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- 温度对丙酮酸生物合成动力学、能荷和氧化-还原度的影响被引量：26收藏
- 作者：王翠华 李友元 陈长华 李啸
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《生物工程学报》 2006
- 关键词：丙酮酸 生物合成 动力学 能荷 氧化-还原度
- 摘要：在光滑球拟酵母(Torulopsis glabrata620)生产丙酮酸的过程中,温度对丙酮酸生物合成有着重要的影响。考察了不同发酵温度下基质消耗、细胞生长、丙酮酸合成及能荷水平和氧化-还原度等方面的差异。在恒温发酵中,...
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- 豆油对红霉素生物合成的影响及作用机制分析被引量：22收藏
- 作者：卞晨光 宫衡 陈长华 付水林
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2004
- 关键词：豆油 红霉素 丙酰辅酶A合成酶 丙酸激酶 柠檬酸 α-酮戊二酸
- 摘要：在摇瓶培养过程中,培养基中加入豆油可使红霉素的效价从3038U/mL(不加豆油)提高到5221U/mL。但对丙酰辅酶A合成酶及红霉素链霉菌H18丙酸激酶的比活力无显著影响。使用HPLC检测发酵液中α-酮戊二酸(α-KG)...
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- 酰基激酶和酰基CoA合成酶对螺旋霉素合成的影响被引量：17收藏
- 作者：李友元 陈长华 李永东 李东红 陈国豪
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2001
- 关键词：螺旋霉素 酰基激酶 酰基CoA合成酶 影响因子 生物合成 激活作用 抗生素
- 摘要：螺旋霉素链霉菌生物合成螺旋霉素的过程受许多酶的调控作用。酰基激酶和酰基 Co A合成酶是螺旋霉素内酯环合成的重要酶。实验测定了它们的酶活趋势和酶的影响因子。结果表明 ,酰基激酶和酰基 Co A合成酶都有两个活力峰 ,前者...
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- 洛伐他汀发酵培养基配方优化及15L罐放大被引量：15收藏
- 作者：吴波 陈长华 杨琳
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《中国抗生素杂志》 2007
- 关键词：响应面设计法 洛伐他汀 土曲霉 发酵
- 摘要：利用响应面方法对土曲霉生产洛伐他汀的培养基进行了优化,使用两水平因子实验对培养基中的碳、氮源组分:葡萄糖、豆粕、蛋白胨、麦精和硝酸钠对洛伐他汀效价的影响进行分析,发现主要的影响因素为葡萄糖和豆粕。通过进一步中心组合实验,...
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- 红霉素A发酵条件的优化被引量：15收藏
- 作者：李啸 陈长华 李友元
- 机构：华东理工大学生物工程学院国家生物反应器重点实验室
- 来源：《中国医药工业杂志》 2006
- 关键词：红霉素 生物合成 响应面设计 优化
- 摘要：采用两水平因子设计和响应面设计,以红霉素A的相对含量为目标函数建立二项式模型,经Design-Expert 6．0．10软件分析得到优化结果:每100ml发酵液中分别补入ATP 0．00102g、L-蛋氨酸0．01132...
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- 乳糖诱导重组人SOD基因在大肠杆菌中的表达被引量：14收藏
- 作者：叶姣 陈长华 杨雅琴 付水林 蔡宝菊
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《中国医药工业杂志》 2001
- 关键词：超氧化物歧化酶 重组大肠杆菌 乳糖 诱导剂 基因表达
- 摘要：利用乳糖代替 IPTG诱导 rh Cu/ Zn- SOD在大肠杆菌 (Escherichia coli) BL2 1(DE3)中的表达 ,并将菌体生长情况及产物表达规律与 IPTG诱导进行比较。对诱导所需的乳糖浓度、金属...
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- 红霉素生产及其有效组分转化的优化被引量：13收藏
- 作者：李啸 陈长华 朱凤 李友元
- 机构：国家生物反应器重点实验室华东理工大学生物工程学院
- 来源：《中国抗生素杂志》 2005
- 关键词：红霉素 生物合成 HPLC 发酵 优化
- 摘要：以红霉素生产菌红色链霉菌HB为研究对象,根据红霉素生物合成机理,以促进甲基化转化和强化基础代谢为主要手段,在利用摇瓶和50L罐发酵生产红霉素的过程中,在大约127h的时候,向发酵液中流加ATP、L-Met、MgSO4和柠...
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- 人铜锌超氧化物歧化酶cDNA的克隆、表达、发酵及纯化工艺研究被引量：12收藏
- 作者：施惠娟 范立强 陈长华 吴祥甫 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所;中国科学院上海生物化学研究所
- 来源：《中国药学杂志》 1999
- 关键词：铜 锌 超氧化物歧化酶 CDNA 基因克隆
- 摘要：目的：用基因工程的方法获得人铜锌超氧化物歧化酶（ｈＣｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ）的高产菌，通过发酵培养，最后纯化获得大量廉价的高纯度的ｈＣｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ。方法：用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），扩增了人铜锌超氧化物歧化酶（...
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- 添加物对D-核糖生物合成的影响被引量：12收藏
- 作者：陈长华 付水林 肖青 石锋 邱蔚然 高淑红
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《工业微生物》 2000
- 关键词：D-核糖 发酵 生物合成 产量 山利醇 葡萄糖酸
- 摘要：采用枯草杆菌D2 0 1转酮醇酶缺陷型突变株 ,研究菌种生长与D 核糖合成优化工艺。在培养剂中添加山梨醇、KH2 PO4和芳香族氨基酸 ,发现对菌的生长有刺激作用 ,特别是山梨醇 ,它可缩短延迟期 ,促进菌的生长。此外 ...
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- Co^(2+)对红霉素生物合成过程的影响被引量：12收藏
- 作者：杜雯 陈长华
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2006
- 关键词：红霉素 糖代谢 甲基丙二酰CoA异构酶 甲基丙二酰CoA羧基转移酶 有机酸
- 摘要：研究了红霉素生物合成过程中糖代谢相关的关键酶:己糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶、磷酸果糖激酶和异柠檬酸脱氢酶,以及合成红霉内酯环前体甲基丙二酰CoA相关的酶:甲基丙二酰CoA异构酶和甲基丙二酰CoA羧基转移酶的时序变化,并...
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- 豆油在红霉素发酵中的作用及作用机制的研究被引量：12收藏
- 作者：沈兆兵 陈国豪 陈长华
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《中国抗生素杂志》 2006
- 关键词：豆油 红色糖多孢菌 红霉素发酵 α-酮戊二酸 甲基丙二酰CoA 琥珀酸
- 摘要：红色糖多孢菌D在15L发酵罐的基础培养基和发酵过程中补加豆油,当基础培养基中豆油量加倍时,效价提高43.1%;发酵过程补加豆油罐的红霉素效价、生产强度和Yp/s比不补豆油的分别提高了69.7%、69.6%和63.8%。通...
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- 螺旋霉素生物合成代谢流量分析被引量：9收藏
- 作者：李友元 陈长华
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《中国抗生素杂志》 2002
- 关键词：螺旋霉素 生物合成 代谢流量分析
- 摘要：通过对螺旋链霉菌的中间代谢产物及有机酸的分析 ,建立了螺旋霉素生物合成的动态流量分布图 ,并分析了螺旋霉素生物合成代谢网络的节点。分析认为 ,大环成环步骤和 FO- 1步骤在发酵中前期有一定的限速影响 ;同时由于 FO-...
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- Mg^(2+)和氨基酸对重组大肠杆菌BL21(DE3)生长及羧肽酶原B表达的影响被引量：9收藏
- 作者：张文超 陈长华 李素霞 张晓彦
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《中国生物制品学杂志》 2006
- 关键词：羧肽酶原B 重组大肠杆菌 发酵 表达
- 摘要：目的研究Mg2+和氨基酸对重组菌株生长及表达pCPB的影响。方法通过摇瓶和发酵罐培养,观察不同Mg2+浓度和氨基酸对重组菌的生长和羧肽酶原B表达的影响。结果添加1g/L Mg2+能提高质粒的稳定性;添加氨基酸能使羧肽酶原...
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- 腺苷发酵液中有机酸的代谢规律被引量：8收藏
- 作者：王恒伟 陈长华 付水林 李友元
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2004
- 关键词：腺苷发酵 有机酸 TCA循环 TCA强化论
- 摘要：选取了优化过程中典型的3种含有不同碳源的培养基配方(其中配方A中含有100g/L葡萄糖,配方B中含100g/L蔗糖,配方C中含100g/L蔗糖和10g/L谷氨酸),进行摇瓶发酵生产腺苷(AR),以测定发酵液的生化参数。通...
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- Streptomyces lincolnensis新遗传操作方法的建立以及lmbQ基因功能研究被引量：8收藏
- 作者：王增亮 赵群飞 高淑红 陈长华 刘文
- 机构：华东理工大学生物工程学院;中国科学院上海有机化学研究所
- 来源：《生物技术通报》 2010
- 关键词：林可链霉菌 林可霉素 属间接合转移 lmbQ基因 同框敲除
- 摘要：以载体pSET152和pKC1139为出发质粒,通过供体菌大肠杆菌ET12567和S17-1转入林可链霉菌(Streptomyces lincolnensis),建立和优化了接合转移体系。林可霉素生物合成基因簇中,lmb...
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- Torulopsis glabrata 620在丙酮酸生物合成中的能荷变化和氧化-还原态趋势被引量：6收藏
- 作者：王翠华 李友元 陈长华 李啸
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2006
- 关键词：高效液相色谱法 丙酮酸 能荷 氧化-还原态
- 摘要：建立了用高效液相色谱法同时测定丙酮酸产生菌Toru lop sis g labrata 620中的ATP、adP、AM P、Nad+和NadH的方法,从而描绘了在整个发酵过程中菌体的能荷变化和氧化-还原态趋势,指出菌体的...
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- 丙三醇对螺旋霉素生物合成过程的影响被引量：5收藏
- 作者：胡蓉 陈长华 张琪 刘迎宾
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;天方药业股份有限公司
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2009
- 关键词：丙三醇 螺旋霉素 促进剂 单因子设计法
- 摘要：在螺旋霉素链霉菌发酵过程中,添加丙三醇有助于螺旋霉素的合成。在摇瓶实验中,于发酵开始时添加丙三醇（φ=0.000 8）效价提高约20%～30%。在50 L发酵罐上进行放大实验,不仅成功地验证了丙三醇的促进作用,还通过测定...
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- 金属离子对红霉素生物合成的影响被引量：5收藏
- 作者：李啸 陈长华 李友元
- 机构：华东理工大学国家生物反应器重点实验室
- 来源：《中国抗生素杂志》 2006
- 关键词：红霉素 响应面设计 金属离子 生物合成
- 摘要：本文采用优化设计方法研究金属离子在红霉素生物合成中的交互作用,应用两水平因子设计和响应面设计,以最终发酵液的生物效价为目标函数建立模型,通过软件分析得出优化结果：钼酸钠0．046lg/100ml；硫酸锌0．004g/10...
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- 表面活性剂对Bacillus sp. ATCC 21616合成腺苷的影响被引量：4收藏
- 作者：高淑红 毛利斯 陈长华 张嗣良
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《工业微生物》 2008
- 关键词：腺苷 发酵 表面活性剂 芽孢杆菌
- 摘要：研究了三种不同的表面活性剂对芽孢杆菌ATCC21616的腺苷合成和菌体生长的影响。结果发现,非离子表面活性剂Tween 80对腺苷合成的促进作用最大,而阳离子表面活性剂CTAB对菌体抑制作用明显。添加低浓度阴离子表面活性...
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- 螺旋霉素生物合成中间代谢物的LC-ESI-MS定性分析被引量：4收藏
- 作者：李友元 陈长华 陶萍
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;上海交通大学分析测试中心
- 来源：《分析测试学报》 2002
- 关键词：生物合成 LC-ESI-MS 定性分析 液相色谱-质谱法 电喷雾离子化 螺旋霉素 中间代谢物 抗生素
- 摘要：利用液相色谱 -电喷雾离子化质谱联用技术定性分析了螺旋霉素生物合成的中间代谢物 ,在螺旋霉素发酵液中共检出7个中间代谢物 ,分别是 :forocidinⅠ、forocidinⅡ、neospiramycinⅠ、neospi...
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- 重组人Cu·Zn-SOD工程菌发酵工艺的研究被引量：4收藏
- 作者：陈长华 付水林 范立强 苏惠娟 魏东芝 袁勤生
- 机构：华东理工大学生物工程学院
- 来源：《药物生物技术》 1999
- 关键词：SOD 发酵 重组 大肠杆菌 铜 锌
- 摘要：人Cu·Zn SOD是一种重要的氧自由基清除剂 ,传统工艺是从动物血中提取得到 ,受原料来源的限制。从人胎肝中提取了hCu·Zn SODcDNA构建了基因工程菌 ,同时对其表达产物的条件进行研究 ,着重探索了接种量、接种...
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- 基于液质联用技术解析和降低螺旋霉素发酵杂质被引量：3收藏
- 作者：李友元 陈长华 顾熠峰 李晓勇
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;河南天方药业股份有限公司
- 来源：《生物工程学报》 2005
- 关键词：液质联用 螺旋霉素 杂质 优化
- 摘要：目前螺旋霉素生物合成的发酵杂质含量过高 ,导致成品收率过低 ,杂质含量不符合药典规定。为解决这一问题 ,首先利用LC -MS联用技术定性分析了 4种螺旋霉素发酵杂质的结构 ,结合螺旋霉素生物合成途径分析 ,它们都起因于螺...
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- 吐温-85对螺旋霉素发酵过程的影响被引量：3收藏
- 作者：朱凤 陈长华 张琪
- 机构：国家生物反应器工程国家重点实验室;河南天方药业股份有限公司
- 来源：《中国医药工业杂志》 2008
- 关键词：螺旋霉素 吐温-85 效价
- 摘要：研究了在培养基中添加吐温-85对发酵生产螺旋霉素的影响。结果表明:0h添加100mg/L吐温-85,发酵效价达28176u/ml,比对照提高11.9%。检测表明吐温-85可以增加细胞膜的通透性,提高乙酸激酶、酰基CoA合...
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- 超声波辅助Urea-Free试剂结合热变性快速酶解蛋白质被引量：3收藏
- 作者：李雅萍 李友元 周新文 陈长华 张嗣良 杨芃原
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;复旦大学生物医学研究院
- 来源：《分析化学》 2010
- 关键词：超声波辅助 热变性 蛋白质 酶解 质谱
- 摘要：建立了一个超声功率-超声时间的安全区域,在此范围内进行超声波辅助酶解时,能避免超声波随机断裂蛋白质;在此安全区域内采用响应面法获得最佳超声功率和超声时间。建立了超声波辅助Urea-Free试剂结合热变性快速酶解蛋白质的方...
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- 土曲霉发酵过程中菌形和有机酸积累对产物合成的影响被引量：2收藏
- 作者：吴波 陈长华 张琪
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;河南天方药业股份有限公司
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2008
- 关键词：土曲霉 菌形 有机酸 洛伐他汀
- 摘要：对土曲霉(Aspergillus terreus)产洛伐他汀过程中胞内外有机酸浓度进行测定,发现菌形对发酵过程胞内外有机酸浓度和洛伐他汀的产量有很大的影响。在发酵过程中形成球状菌比丝状菌更有利于洛伐他汀的合成,并且球状菌...
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- 金属离子对红霉素合成及组分转化的影响及机理分析被引量：2收藏
- 作者：赵腾 高淑红 陈长华 叶蕊芳 张增辉 李强 孙玉洁
- 机构：生物反应器工程国家重点实验室;河南天方药业股份有限公司
- 来源：《中国抗生素杂志》 2013
- 关键词：糖多孢红霉菌 红霉素 金属离子 组分转化 基因表达
- 摘要：目的研究Co2+、Zn2+和Na2MoO43种金属离子对糖多孢红霉菌发酵生产红霉素及组分转化的影响,并对其影响机理进行相关分析。方法通过摇瓶实验确定金属离子最优配比,并在15L发酵罐上放大;通过菌体在合成培养基中的摇瓶发...
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- 枯草芽孢杆菌ATCC21216腺苷磷酸化酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2收藏
- 作者：全敏 高淑红 陈长华
- 机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
- 来源：《华东理工大学学报（自然科学版）》 2007
- 关键词：腺苷磷酸化酶 deoD基因克隆 蛋白表达 大肠杆菌
- 摘要：聚合酶链式反应(PCR)扩增枯草芽孢杆菌ATCC21216(His-)编码腺苷磷酸化酶的基因deoD(0.7 kb),测序表明与枯草芽孢杆菌168的deoD同源性为98.7%。将此基因插入质粒pET28a(+)(5.3 ...
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